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iTRAQ定量蛋白质组學;重要内容;iTRAQ技术简介;*;*;※首选2-3次生物反复,最佳3次或以上
?组内样品個体差异大的材料需要更多的生物反复
?生物學反复样品较多時,可以合适混合以減少样品数目
?無任何反复,可以結合其他技术進行验证;iTRAQ试剂標识原理;图1iTRAQ技术原理图;iTRAQ技术优势;iTRAQ试验流程;iTRAQ试验成果示例;案例1:人脑脊液(客户文章未刊登,资料仅供内部参照);成果;;数据分析;数据分析;数据分析;数据分析;案例2。蜂王浆提取物對肿瘤细胞的影响;数据分析;客户关注的信号通路(pathway);;; 差异体現蛋白互相作用网络分析
;总結;高阶(客制化)信息分析;iTRAQ详细试验环节—ABI试剂盒;iTRAQ详细试验环节;iTRAQ详细试验环节;iTRAQ详细试验环节;iTRAQ详细试验环节;iTRAQ详细试验环节;B%從5分钟5%到40分钟上升至25%
Time(min)B%
0 0
5 5
4025
4580
5080
510
60stop
根据峰型和時间共收取20個梯度,真空离心浓缩後,用50μLRPLCA相[5%ACN,0.1%甲酸(TEDIA,Fairfield,USA)]溶解,進行第二维分析。;iTRAQ详细试验环节;Time(min)B%
55%
9035%
9580%
10080%
1055%
120stop
质谱鉴定:MS扫描范围400-1800
MS/MS扫描范围100-
IDA采集模式
壹种图谱选择四個最强的母离子進行串级扫描。;iTRAQ详细试验环节;THANKS!
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