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生物制药知识点

发酵生产三要素

生产菌种、发酵工艺和发酵设备

蛋白质药物的缺点

药理作用的放大或延伸、免疫毒性、杂质或污染物引起的毒性。

生产药物的天然微生物类型

细菌：大肠杆菌属、短杆菌属、节杆菌属等；

放线菌：链霉菌属、诺卡氏菌属、小单孢菌属、游动放线菌属。

真菌：藻状菌纲（根霉、梨头霉属）、子囊菌纲（酵母菌属、裂殖酵母属）、担子菌纲（牛肝

菌属、灵芝属）、半知菌纲（曲霉属、青霉属、头孢霉菌属）

发酵的基本过程菌种一一种子制备一一发酵一一发酵液预处理一一提取精制。

菌种保存生产菌种须以休眠状态保存在砂土管或冷冻干燥管中，并置于0～4℃恒温冰箱(库)

内。使用时可临时取出，接种后仍需冷藏。

使用期生产菌种一般都严格规定其使用期，一般砂土管为1～2年。

常用兼性贴壁依赖性细胞：对支持物的依赖性不严格，既可贴壁生长，也可悬浮生长。

CHO细胞、BHK细胞、L929细胞。

治疗性单抗适应症

(1).肿瘤治疗。抗体药物通过多种机制发挥抗肿瘤作用。通过抗体依赖细胞毒作用（ADCC）

和补体依赖细胞毒作用（CDCC）等途径直接杀伤肿瘤细胞；改变细胞信号转导，诱导肿瘤

细胞凋亡；抗体可以向靶向运送细胞毒素结合物直接杀伤肿瘤细胞。

(2).免疫疾病治疗。通过结合免疫病理过程中的重要因子，阻断其功能而发挥作用。

游离植物细胞的制备

定义：使细胞膜和细胞质中大部分蛋白质和脂质被溶解抽提掉，

但细胞骨架系统蛋白质却不受破坏而被保存下来，经固定和染色后可在光镜下，见到网状结

构的细胞骨架，然后融合某种细胞核。

酶在医药领域的应用

疾病诊断：一是根据体内原有酶活力的变化来诊断某些疾病，而是利用酶来测定体内某些物

质的含量，诊断某些疾病。

疾病治疗：酶可以作为药物治疗多种疾病，用于治疗疾病的酶成为药用酶。

药物生产：利用酶的催化作用将前体物质转变为药物。

分析检测：酶法检测或酶法分析。

菌种保藏的原理及措施

原理：使菌种代谢处于不活跃状态，即生长繁殖受抑制的休眠状态

措施：物理和化学方法（低温；干燥；缺氧；营养缺乏）

低温斜面保藏：低温降低新陈代谢。4℃短期保藏，1－6个月；易变异。

石蜡封存：隔绝氧气，减少蒸发。4℃，约1年。

砂土管保藏：干燥抑制生长。孢子吸附在砂土上，真空抽气干燥。干燥器于冰箱，数年。

冷冻干燥保藏：保护剂降低菌体细胞冰点，减少冰晶对细胞伤害。低温避光，中期保藏，5～

10年。

液氮保藏：培养物与冷冻保护剂混合，密封。液氮（-196℃）罐或-80℃冰箱。长期保藏

改善基因工程菌不稳定性的策略

基因工程菌：以微生物为操作对象，通过基因工程技术获得的过量表达外源基因或抑制表达

自身基因的工程生物体。

高密度培养的优点

缩小发酵体积、增加表达量、成本低，生产率高。

影响质粒稳定的因素

与质粒稳定有关的基因及质粒结构自身对其稳定性的影响

宿主对质粒稳定的影响

质粒拷贝数

重组质粒的表达对质粒稳定性的影响

微生物转化反应的特点

蛋白酶为催化剂

对立体结构合成上具有高度的专一选择性

反应速度快

反应条件温和

种子活化

将保存的菌种接种在固体培养基上，在适宜条件下培养，恢复其固有生物特性。

融合蛋白

将抗体分子片段与其它蛋白融合，可得到具有多种生物学功能的融合蛋白，如免疫毒素

(immunotoxin)、免疫细胞因子(immunocytokine)、免疫黏附素(immunoadhe2sin)

单域抗体

又称纳米抗体或重链抗体，仅由重链构成，其抗原结合区仅是一个通过铰链区与Fc区连接

的单结构域，而且这个抗原结合区自抗体上分离后仍具有结合抗原的功能，这就为抗体的分

子构建提供了一个新方法。基于单域抗体的一系列优点，在免疫实验、诊断与治疗中，它将

发挥超乎想象的巨大功能。

人源化抗体

人源化抗体就是指抗体的可变区部分（即Vh和Vl区）或抗体所有全部由人类抗体基因所

编码。人源化抗体可以大大减少异源抗体对人类机体造成的免疫副反应。

植物诱导子

诱导子可调节植物次生代谢，适宜条件下可明显提高植物细胞中有用的次生代谢产物的含

量。

非生物诱导子非细胞天然成分，可触发形成植保素的信号因子，如水杨酸、茉莉酸、茉莉

酸甲酯、稀土元素、重金属盐等。

生物诱导子指微生物类诱导子，如真菌孢子、菌丝体、匀浆、真菌细胞壁成分、真菌培养

物滤液等。

微生物转化

通过微生物细胞将复杂的底物进行结构修饰,即利用微生物谢过程中产生的某个或某一系列

的酶对底物特定部位(基团)进行