葡萄和葡萄酒中13种杀菌剂的测定 高效液相色谱-串联质谱法.docx

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葡萄和葡萄酒中13种杀菌剂的测定高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了葡萄和葡萄酒中13种杀菌剂（多菌灵、稻瘟灵、苯霜灵、吡噻菌胺、苯酰菌胺、吡唑醚菌酯、氟硅唑、氟吗啉、吡唑萘菌胺、氟环唑、氟吡菌酰胺、氟吡菌胺、恶霜灵）的高效液相色谱-串联质谱检测方法。

本文件适用葡萄和葡萄酒中13种杀菌剂的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法

DB22/T2817-2017《人参中苯醚甲环唑等9种杀菌剂残留量的测定气相色谱串联质谱法》

DB34/T2822-2017《植物源产品中22种三唑类杀菌剂残留量的测定液相色谱串联质谱法》SN/T3699-2013《出口植物源食品中4种噻唑类杀菌剂残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法》T/ZNX031-2023《水和鱼类中23种三唑类杀菌剂残留量的测定液相色谱法-串联质谱法》

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样经乙腈超声提取，QuEChERS法净化后，经反相色谱柱分离，以保留时间定性，供高效液相色谱-串联质谱仪测定和确证，外标法定量。

5试剂和材料

本方法所用的试剂，除另有规定外，均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈：色谱纯。

5.1.2甲醇：色谱纯。

5.1.3乙酸铵：色谱纯。5.1.4甲酸：优级纯。

5.1.5氯化钠（NaCl）：优级纯。

5.1.6无水硫酸镁（MgSO4）粉末：粒径50μm。5.1.7N-丙基乙二胺（PSA）粉末:粒径50μm。

5.1.80.02%甲酸的水溶液：取0.2mL甲酸用水定容到1000mL，摇匀。

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5.1.9乙酸铵-甲酸水溶液（5mmol/L）：称取0.385g乙酸铵，用0.02%甲酸的水溶液溶解定容至1000mL，摇匀。

5.2标准品

5.2.1标准品：多菌灵（纯度：99.1%，CAS：10605-21-7）、稻瘟灵（纯度：98.7%，CAS：50512-35-1）、苯霜灵（纯度：99.3%，CAS：71626-11-4）、吡噻菌胺（纯度：99.0%，CAS：183675-82-3）、苯酰菌胺（纯度：98.7%，CAS：136052-68-5）、吡唑醚菌酯（纯度：99.2%，CAS：175013-18-0）、氟硅唑（纯度：98.5%，CAS：85509-19-9）、氟吗啉（纯度：98.3%，CAS：211867-47-9）、吡唑萘菌胺（纯度：99.0%，CAS：881685-58-1）、氟环唑（纯度：98.8%，CAS：133855-98-8）、氟吡菌酰胺（纯度：99.9%，CAS：658066-35-4）、氟吡菌胺（纯度：99.0%，CAS：239110-13-7）、恶霜灵（纯度：99.3%，CAS：77732-09-3），浓度均为1000mg/L。

5.2.2标准储备液：分别准确吸取1000.0mg/L的13种杀菌剂标准溶液各100μL，用乙腈溶解并定容至10.0mL，配制成10.0mg/L的混合标准储备液，于-18℃避光保存，有效期3个月。

5.2.313种杀菌剂混合标准工作溶液：准确吸取不同体积的标准储备液，用空白基质配制成质量浓度分别为1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10.0ng/mL、20.0ng/mL、50.0ng/mL、100.0ng/mL、200.0ng/mL、300.0ng/mL的系列标准工作液，临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱-串联质谱仪：配备电喷雾离子源(AJS-ESI)。6.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。

6.3涡旋混合器。

6.4高速冷冻离心机：最大转速10000r/min。

6.5色谱柱：C18，2.1mm×100mm，粒径3.5μm或性能相当。

7测定步骤

准确称取10.0g样品（精确至0.01mg）于50.0mL具塞离心管中，精密加入20mL乙腈、5g氯化钠，涡旋震荡5min，8000r/min离心5min。移取上清液至装有600mg无水MgSO4和100mgPSA的高速离心管中，涡旋混合2min，8000r/min离心5min，吸取上清液