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凝集反应--
直接凝集反应(玻片法)
[目的]:掌握凝集反应的原理,熟悉其操作方法。
[原理]
直接凝集反应:是指颗粒性抗原(凝集原)与相应的抗体(凝集素)直接结合所呈现的凝集现象。如红细胞ABO血型的测定,测定细菌的细菌凝集试验。
是一种快速简便的定性检测方法。即将待检的抗原悬液或抗血清与已知的抗体或抗原滴加于玻片后混匀,数分钟后,用肉眼或低倍镜观察,出现凝集块者为阳性。
[操作方法]1.取清洁载物玻片一张,用蜡笔划为三格,并注明号码。于第一格和第二格内各加约30ul伤寒杆菌A-F群O多价血清及志贺氏痢疾多价血清,第三格内滴加约30ul生理盐水。
2.用接种环挑取待检菌种少许,分别均匀地涂抹于1、2、3格内的液体中。接种环每次使用前后均需经酒精灯火焰烧灼灭菌。3.轻轻摇动玻片,数分钟后用肉眼观察结果,出现灰白色凝集颗粒者即为阳性反应;仍为均匀混悬液者为阴性反应。如结果不够清晰,可将玻片放于低倍显微镜下观察。
[结果分析]如只与伤寒杆菌A-F群O多价血清凝集者则待检菌种为伤寒杆菌;只与志贺氏痢疾多价血清凝集者则为痢疾杆菌。
[注意事项]1.玻片要洁净。2.在玻片上要标记好标准血清记号。3.接种环每次使用前后均需经酒精灯火焰烧灼灭菌。以免造成污染。4.切忌将两种两种不同的标准血清相混。
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