细菌耐药性的非特异性机制.ppt

3、其它抗性机制

3）大肠埃希菌中还存在有对磺胺药物的主动转运机制。从大肠埃希菌磺胺抗性株中分离出一种sur基因，其编码的产物类似于反转蛋白，它依赖质子偶联交换产生的质子驱动力将药物外排;4）TMP的不渗透性。在肺炎克氏杆菌、粘质沙雷氏菌及肠杆菌中已发现由于外膜蛋白的改变产生了包括TMP在内的多药抗性。第95页,共126页，星期六，2024年，5月3、其它抗性机制5）固有耐药性。有多种细菌存在着内源性TMP抗性，与大肠埃希菌相比，乳酸杆菌的DHFRs对TMP的敏感程度要低，啤酒片球菌(Pediococcuscerevisiae)对TMP的IC50要高出1000倍，脆弱拟杆菌及梭状芽孢杆菌(Clostridiumspp)等厌氧菌对TMP更加不敏感，从其中分离纯化的DHFR与大肠埃希菌相比，IC50要高出几百至上千倍;铜绿假单胞菌可渗透突变株尽管靶酶(DHFR)的表达活性与野生株相同，但对TMP非常敏感。铜绿假单胞菌及其他一些假单胞菌对TMP的抗性是由于细胞壁通透性较低的缘故。第96页,共126页，星期六，2024年，5月3、其它抗性机制6）有的病原菌如沙门氏菌能对多种抗生素产生抗药性，它的形成与菌体R因子或跳跃因子以及致命毒素的产生有密切关系。特别是当抗药性致病菌侵染宿主后大量繁衍，形成“菌膜”（菌体群），而上述这些因子或毒素通过菌体繁衍，彼此交流信息，相互传播，为其自身的生存与发展形成强力抗药性或强毒力的生物武器.第97页,共126页，星期六，2024年，5月二、喹诺酮类药物的作用机制及细菌耐药性

（一）喹诺酮类药物的作用机制喹诺酮类抗菌药物的作用机制涉及到其与最早发现的作用靶位DNA促旋酶以及拓扑异构酶IV（与拓扑异构酶II相关）发生交互作用;不同细菌中的这两种酶对很多喹诺酮类药物的敏感性是不同的:一般地，革兰氏阴性菌中的DNA促旋酶往往对药物的敏感性大于拓扑异构酶IV对药物的敏感性，而革兰氏阳性菌中的情况正好相反。第98页,共126页，星期六，2024年，5月二、喹诺酮类药物的作用机制及细菌耐药性

（一）喹诺酮类药物的作用机制这类抗菌药物对细菌作用的标志是药物通过与DNA、DNA促旋酶或拓扑异构酶IV发生交互作用形成三元复合物，药物的这种作用诱导DNA和拓扑异构酶IV发生构型改变，从而导致这种酶对DNA不能发挥正常的功能;X-线结晶学研究发现：DNA促旋酶A亚基的结构中似乎有一个能够与喹诺酮类药物结合的结构域，而拓扑异构酶IV结构中尚未发现类似的结构域。第99页,共126页，星期六，2024年，5月二、喹诺酮类药物的作用机制及细菌耐药性

（一）喹诺酮类药物的作用机制喹诺酮类抗菌药物抑制DNA的合成一方面通过对靶酶的作用，使DNA断裂，另一方面用可逆的喹诺酮类-DNA-拓扑异构酶三元复合物与复制叉碰撞而转化为不可逆的状态;但是往往在可逆的三元复合物中随之产生DNA双链的断裂，这就启动了细胞的死亡。第100页,共126页，星期六，2024年，5月促旋酶-DNA-喹诺酮类复合物的交互作用模式第101页,共126页，星期六，2024年，5月1、喹诺酮类抗菌药物的双重作用靶位

1）DNA促旋酶

细菌的DNA促旋酶是一个由两种亚基组成的分子量为400kD的四聚体。105kD的A亚基由gyrA基因（即nalA）编码，与DNA链的断裂和重新连接的过程有关。变性时，A亚基通过和DNA底物以转酯化作用形成共价连接。分子量为95kD的B亚基由gyrB基因（即cou）编码，具有ATP的功能，促使DNA形成超螺旋。这种DNA促旋酶是细菌体内独特的拓扑异构酶II，是已知的唯一能够使双链DNA产生负超螺旋化的拓扑异构酶。第102页,共126页，星期六，2024年，5月DNA促旋酶的作用模式第103页,共126页，星期六，2024年，5月2)拓扑异构酶拓扑异构酶的功能是改变DNA的连接数目和DNA的拓扑结构，使其发挥正常的功能。拓扑异构酶的作用方式一般经过三个步骤完成:第一步是酶与DNA结合，使DNA的一条链或两条链产生缺口或断裂；第二步是酶从已经形成的临时缺口通过DNA链，这个过程正常情况下在分子内进行，但在特殊情况下也可以在分子间进行而导致杂合DNA分子的形成；在最后阶段，断开的DNA链重新闭合，形成相对于天然DNA底物或是“松弛”或是“超螺旋”的双链，并释放出DNA和酶。第104页,共126页，星期六，2024年，5月2)拓扑异构酶拓扑异构酶I使单链DNA断裂和闭合，这些酶能够促使DNA形成不同的拓扑结构的互变，从而使连接数目发生变化。拓扑异构酶II利用双链DNA的临时性双链缺口以改变DNA的拓扑结构，使DNA连接