原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
限制热量对NIT1细胞胰岛素/胰岛素样生长因子通路及
胰岛素分泌功能的影响
作者：朱志宏陈慎仁傅玉才魏炽炬杨杰华林超
【摘要】目的研究限制热量(CR)对胰岛素β瘤细胞(NIT1)细胞胰岛素/胰岛素样生长因子(IGF1)信号通路及胰岛素分泌功能的影响，为2型糖尿病(T2DM)的发病机制及防治提供实验依据和理论基础。方法NIT1细胞培养至指数生长期，分别用PI3K的阻断剂LY294002(LY)进行干扰，实验分成4组：对照组；CR组；LY+CR组；LY组。用RTPCR、免疫细胞化学等方法检测Foxo1及其下游基因的转录及表达，用放射免疫及免疫细胞化学法检测胰岛素的分泌及表达，用细胞计数法检测细胞倍增周期。结果①CR可使NIT1细胞倍增周期延长；②Foxo1主要定位于胞浆，阻断PI3K后Foxol从胞浆移入胞核，mRNA转录减少；③CR在正常状态及PI3K通路障碍的细胞均可使FoxolmRNA转录增加，并影响其下游基因p27、Bim的转录；④PI3K通路障碍可使NIT1细胞胰岛素分泌增加，CR则可使PI3K通路障碍的NIT1细胞胰岛素分泌减少。结论CR不需通过上游PI3K/Akt,可直接或间接作用于Foxo1参与对胰岛素/IGF1信号通路的调控，延长细胞寿命，增强NIT1细胞的糖耐量，改善胰岛素信号的传导及NIT1的胰岛素分泌功能；可能参与了T2DM的发生发展。
【关键词】限制热量；胰岛素/胰岛素样生长因子；Foxol;胰岛素；2型糖尿病
【Abstract】0bjectiveToinvestigatetheeffectsofCalorieRestriction(CR)oninsulin/IGF1signalpathwayandinsulinsecretionintheβneoplasticcel1NIT1.MethodsNIT1cellswereculturedtoexponentialgrowthphaseintwodifferentways,oneofwhichwithhighglucosemedium,anotherglucosewasnegative.ThenbothofthemwerestimulatedbyLY294002(LY),theblockingagentofPI3K.SamplesweredividedintoLY,LYandCR,CRandDMSOgroupsasthecontro1.TheexpressionsofFoxolanditstargetsp27,BimandFasLwere
detectedbyRT]PCRandimmunocytochemicalassay.The
secretionandexpressionofinsulinweredetectedbyradioimmunityandimmunocytochemica1assay.Thece11multiplicationcyclewasmeasuredbycytometry.Results①CRextendedthecel1multiplicationcycle;②Foxolwaslocatedinthekytoplasm,itmovedintothenucleusanddiminisheditstranscriptionwhenthePI3Kpathwaywasblocked;③CRincreasedthetranscriptionofFoxolnomatterthePI3Kpathwaywasblockedornot;④Insulinsecretionwasobviously
increasedwhenthePI3Kpathwaywasblocked,butCRcouldretuneitseffects.ConclusionsIt
文档评论（0）