抗原抗体反应的类型之沉淀反应（免疫学检验技术课件）.pptx

凝胶免疫电泳技术

凝胶免疫电泳技术凝胶免疫电泳技术电泳分析与沉淀反应的结合产物，是直流电场作用下的凝胶扩散试验，是将抗原抗体反应的高度特异性与电泳技术的高分辨率及快速、微量等特性相结合的一种免疫化学技术。

凝胶免疫电泳技术优点1）加快了沉淀反应的速度2）提高了灵敏度3）分析更细微动画：为什么凝胶免疫电泳技术优于凝胶内沉淀试验？

凝胶免疫电泳技术试验类型1、对流免疫电泳（双扩+电泳，同时进行）2、火箭免疫电泳（单扩+电泳，同时进行）3、免疫电泳（先电泳，后双扩）4、免疫固定电泳（先电泳，后沉淀反应）

凝胶免疫电泳技术试验类型1对流免疫电泳AbAg+-电渗电渗电泳电泳沉淀线动画：对流免疫电泳是怎样对流的？

凝胶免疫电泳技术火箭免疫电泳图①②③④为标准抗原；⑤⑥为标本-+峰形高低（H）与Ag量成正比试验类型2火箭免疫电泳

凝胶免疫电泳技术试验类型3免疫电泳动画：免疫电泳技术检测纯化抗原是否成功

凝胶免疫电泳技术试验类型4免疫固定电泳动画：多发性骨髓瘤M蛋白的产生SPGAMκλSPGAMκλSPGAMκλ动画：免疫固定电泳测M蛋白的基本过程

凝胶内沉淀试验

凝胶内沉淀试验凝胶内沉淀试验指可溶性抗原、抗体在含有电解质的凝胶内自由扩散形成浓度梯度，二者在比例合适的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。

凝胶内沉淀试验常用凝胶琼脂、琼脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）试验类型双向琼脂扩散试验（双扩）；单向琼脂扩散试验（单扩）

凝胶内沉淀试验单向琼脂扩散试验将定量抗体混匀在琼脂中，继而加入待测抗原溶液使其在凝胶内局部向周围自由扩散，抗体与待测的抗原,在两者比例合适的部位结合形成白色沉淀环，环的大小（d）与抗原的浓度成正相关（可定量）。

凝胶内沉淀试验单向琼脂扩散试验基本过程准备一张洁净载玻片→配琼脂（先加热溶解，然后冷却至50℃左右时加入已知Ab）→制板→打孔→1、2、3、4孔加已知浓度Ag→下一排孔加待测Ag→37℃，16h→量出各沉淀环直径d→d-CAg绘制标准曲线→查得待测Ag含量1234Ab已知CAg待测CAg

凝胶内沉淀试验单向琼脂扩散试验形成的沉淀环及标准曲线动画：单向琼脂扩散试验是怎样对抗原进行定量的？环的大小（d）与抗原的浓度（C）成正相关（可定量）

凝胶内沉淀试验双向琼脂扩散试验将抗原抗体分别加在琼脂糖不同的对应孔中，两者在凝胶中自由扩散，在比例合适处形成白色沉淀线（可定性、半定量）。

凝胶内沉淀试验双向琼脂扩散试验基本过程准备一张洁净载玻片→配琼脂（先加热溶解，然后冷却至50℃）→制板→打孔→1、2、3、4孔加Ag→5、6、7、8孔加Ab→37℃，16h→观察每对Ag和Ab间沉淀线形成情gAb

凝胶内沉淀试验双向琼脂扩散试验的应用1、抗原或抗体的定性分析（有无沉淀线gAb动画：怎样解读双向琼脂扩散试验形成的沉淀线？2、抗原或抗体的相对分子量和相对浓度的分析

凝胶内沉淀试验双向琼脂扩散试验的应用3、分析抗原的性质（完全相同“√”；部分相同“√上一点”；完全不同“×”）AbAbAbAg1Ag2Ag1Ag2Ag1Ag2

凝胶内沉淀试验双向琼脂扩散试验的应用4、抗体效价测定出现沉淀线最高的抗体稀释度5、抗原或抗体纯度鉴定微课：双向琼脂扩散试验测效价（走迷宫2）

凝胶内沉淀试验1：2561：1281：641：321：161：81：41：2答案：效价大于等于1：256提问右图中抗体的效价为多少？

凝胶内沉淀试验AgAb？Ag提问将试管中的三角形抗原进行提纯后，用双扩检查纯化效果，结果如下图所示，请问纯化的操作是否成功？答案：不成功

沉淀反应

沉淀反应Ag可溶性Ab+Ag-Ab（沉淀）电解质电解质AgAgAg沉淀反应概念可溶性抗原代表：蛋白质

提问沉淀反应要将下图中两种可溶性抗原连起来，选用1号管中的抗体好还是2号管中的抗体好呢？1号管中的抗体是什么抗体？2号管中的抗体是什么抗体？AgAg121、PcAb2、McAb

液相内沉淀试验免疫学检验技术

液相内沉淀试验液相内沉淀试验类型（1）环状沉淀试验（2）絮状沉淀试验（3）免疫比浊分析

液相内沉淀试验环状沉淀试验抗原溶液叠加在细玻璃管内的抗体液面上，二者在两液面交界处形成白色沉淀环。AbAg白色沉淀环

液相内沉淀试验絮状沉淀试验可溶性抗原、抗体在液相中特异性结合，形成絮状沉淀物（试管内）。

提问液相内沉淀试验有两个玻璃杯，分别装了不同浓度的牛奶，你知道哪一杯牛奶的浓度高吗？怎样测出牛奶的浓度？右边浓度高

液相内沉淀试验免疫比浊分析透射比浊法颗粒吸收光检测器（透射光强度）

液相内沉淀试验免疫比浊分析散射比浊法颗粒反射、折射光检测器（散射光强度）动画：透射比浊法