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专题一、基因工程知识点归纳26844

专题一、基因工程知识点归纳

26844

摘要

isnolife

20XX年XX月

专题一、基因工程知识点归纳26844

专题一基因工程

【高考目标定位】

１、专题重点:DNA重组技术所需的三种基本工具；基因工程的基本操作程

序四个步骤；基因工程在农业和医疗等方面的应用;蛋白质工程的原理。

2、专题难点：基因工程载体需要具备的条件;从基因文库中获取目的基因;

利用PCR技术扩增目的基因；基因治疗；蛋白质工程的原理。

第1节DNA重组技术的基本工具

教材梳理:

知识点一基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的

设计，并通过体外DＮA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，

从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是

在DNＡ分子水平上进行设计和施工的,因此又叫做DNA重组技术。

注意：对本概念应从以下几个方面理解：

操作环境生物体外

操作对象基因

操作水平ＤNA分子水平

基本过程剪切→拼接→导入→表达

结果人类需要的基因产物

知识点二基因工程的基本工具

1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

（１）限制性内切酶的来源:主要是从原核生物中分离纯化来的。

（2）限制性内切酶的作用：能够识别双链ＤNＡ分子的某种特定的核苷酸

序列,并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。

（3)限制性内切酶的切割方式及结果：①在中心轴线两侧将DＮＡ切开,切

口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DＮA,切口是平末端。

２．DNA连接酶——“分子缝合针”

（1）来源:大肠杆菌、T4噬菌体

(2）DNＡ连接酶的种类：E.colｉＤNA连接酶和TＤNA连接酶。

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(3）作用及作用部位：E．ｃoliＤNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸

二酯键,TDNＡ连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。

4

注意:比较有关的DNA酶

专题一、基因工程知识点归纳26844

（1）ＤNA水解酶:能够将DＮＡ水解成四种脱氧核苷酸,彻底水解成膦酸、

脱氧核糖和含氮碱基

（2）DＮA解旋酶:能够将ＤNA或DＮA的某一段解成两条长链，作用的部

位是碱基和碱基之间的氢键。注意：使DNＡ解成两条长链的方法除用解旋

酶以外，在适当的高温（如94℃）、重金属盐的作用下，也可使ＤＮA解旋。

（3)DＮA聚合酶：能将单个的核苷酸通过磷酸二酯键连接成DＮA长链。

(4）ＤNA连接酶:是通过磷酸二酯键连接双链DNA的缺口。注意比较DＮA

聚合酶和DNＡ连接酶的异同点。

3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”

(1）分子运载车的种类:①质粒:常存在于原核细胞和酵母菌中,是一种分子

质量较小的环状的裸露的ＤNA分子,独立于拟核之外。②病毒：常用的病

毒有噬菌体、动植物病毒等。

(2）运载体作用:①是用它做运载工具,将目的基因转运到宿主细胞中去。

②是利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制。

（3)作为运载体必须具备的条件：①在宿主细胞中保存下来并大量复制

②有多个限制性内切酶切点③有一定的标记基因,便于筛选。

第2节基因工程的基本操作程序

教材梳理:

基