当归补血颗粒早期干预结缔组织生长因子防治高血压肾损害及肾血管病变.pdfVIP

当归补血颗粒早期干预结缔组织生长因子防治高血压肾损害及肾血

管病变

目的：探讨当归补血颗粒早期干预结缔组织生长因子（CTGF）在防治高血

压肾损害肾间质纤维化及肾血管病变中的意义。方法：自发性高血压大鼠（SHR），

根据用药时间分为早期组和晚期组，早期组选用8周龄SHR，晚期组选用12周

龄SHR，并设置同龄WKY大鼠为正常对照组。早期组包括当归补血颗粒治疗组

（DG组）和生理盐水对照组（NS组），晚期组包括当归补血颗粒治疗组（GD

组）和生理盐水对照组（NS组）。早期组以当归补血颗粒6g/（kg·d）灌胃，直

至28周龄；晚期组以同样剂量当归补血颗粒灌胃，直至28周龄。尾动脉无创测

压法观察各组大鼠血压情况，生化方法测定治疗前后各组大鼠的血肌酐、尿素氮

和尿β2微球蛋白水平，组织病理学染色观察大鼠肾间质纤维化及肾血管病变情

况，Real-timePCR和WesternBlot检测各组大鼠的CTGF表达。结果：早期组

DG治疗后SHR血肌酐、尿素氮、尿β2MG、肾间质纤维化指数、血管病变评

分、CTGFmRNA和蛋白表达均较NS组明显降低，差异有统计学意义（P＜0.01）。

晚期组治疗后，DG组尿β2MG、肾间质纤维化指数、血管病变评分、CTGFmRNA

和蛋白表达与NS组比较均下降，差异有统计学意义（P＜0.05），早期组的治疗

效果优于晚期组；当归补血颗粒治疗对SHR血压无影响（P0.05）。结论：当归

补血颗粒早期干预治疗能明显改善高血压肾损害大鼠肾功能和肾间质纤维化病

变及血管病变程度，这一作用与干预肾组织CTGF表达相关，与血流动力学无关。

高血压肾损害是原发性高血压引起的良性小动脉性肾硬化和恶性小动脉性

肾硬化及其伴有相应临床表现的疾病。高血压肾损害主要表现为血管的损害和肾

间质纤维化。结缔组织生长因子（ConnectiveTissueGrowthFactor，CTGF）是转

化生长因子β1（TransformGrowthFactorβ，TGF-β1）下游的重要致纤维化因子

之一，早期干预CTGF表达，能阻止纤维化进程[1-2]。那么当归补血颗粒（Danggui

Buxuegranules，DG）早期干预对高血压肾损害的血管病变有无治疗作用，早期

用药是否与CTGF表达相关，本研究将对此进行探讨。

1资料与方法

1.1一般资料36只成年雄性自发性高血压大鼠（SpontaneouslyHypertensive

Rats，SHR）及10只同源雄性（Wistar-Kyoto，WKY）大鼠购于北京维通利华实

验动物技术有限公司。大鼠试喂养1周，根据用药时间分早期组和晚期组，早期

组选用8周龄SHR大鼠，晚期组选用12周龄SHR大鼠，并设置同龄WKY组

大鼠为正常对照。早期组包括当归补血颗粒治疗组（DG组，10只）和生理盐水

对照组（NS组，8只）和同龄WKY大鼠（5只）；晚期组包括当归补血颗粒治

疗组（DG组，10只）和生理盐水对照组（NS组，8只）和同龄WKY大鼠（5

只）。早期DG组6g/（kg·d）灌胃，直至28周龄；晚期组以同样DG灌胃，直

至28周龄；NS组以等量生理盐水灌胃，WKY大鼠不做任何处理。各组大鼠血

压采用无创性尾套式大鼠血压计监测，每周1次，在大鼠清醒状态下测定尾动脉

收缩压，每鼠测量3次，取均值，每周测血压两次。测血压前大鼠经37℃预热

15min。

1.2主要材料当归补血颗粒购自河南省中医院配方颗粒药房，选用黄芪30

g，当归6g；尿β2微球蛋白按照放射免疫试剂盒由中国原子能科学研究所生产；

总RNA提取试剂盒（RNeasyMiniKit试剂盒）购自美国Qiangen公司，逆转录

试剂盒购自美国Promega公司，real-timePCR试剂盒（q-PCRMixture）购自日

本TaKaRa公司，荧光探针实时定量PCR仪（ABI7900HT）购自美国Applied

Biosystems