蛋白质三聚体化模序及其应用 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN101928718A

(43)申请公布日2010.12.29

(21)申请号CN201010133117.9

(22)申请日2010.03.12

(71)申请人哈尔滨医科大学

地址150081黑龙江省哈尔滨市保健路157号

(72)发明人凌虹王甲业李妍钟国才周海舟

(74)专利代理机构北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司

代理人孙皓晨

(51)Int.CI

C12N15/62

C07K19/00

C07K14/005

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

蛋白质三聚体化模序及其应用

(57)摘要

本发明公开了一种蛋白质三聚体化

模序及其应用。该三聚体化模序的氨基酸

序列为SEQIDNO：1所示。本发明蛋白

质三聚化模序根据天然三聚体卷曲螺旋的

序列特征而设计，序列更加优化。在设计

蛋白质三聚化模序的过程中，充分考虑了

各个氨基酸形成寡聚体的倾向，排除了那

些可能具有二聚化、四聚化等寡聚能力的

氨基酸，提高了产品三聚化成分纯度。本

发明蛋白质三聚化模序可广泛用于天然构

象为三聚体的蛋白质的结构和功能研究，

可用于体外表达天然以三聚体形式存在的

蛋白质，进而用于筛选和三聚体形式目的

蛋白相互作用的配体分子。本发明蛋白质

三聚化模序可用于构建和表达天然以三聚

体形式存在的病毒表面抗原，构建候选基

因疫苗或亚单位疫苗。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.一种蛋白质三聚体化模序，其特征在于：其氨基酸序列为SEQIDNO：2所示。

2.编码权利要求1所述蛋白质三聚体化模序的核苷酸序列。

3.按照权利要求2所述的核苷酸序列，其特征在于：其为SEQIDNO：1所示。

4.含有权利要求2或3所述核苷酸序列的表达载体。

5.含有权利要求4所述表达载体的宿主细胞。

6.权利要求1所述的蛋白质三聚体化模序在制备或表达蛋白质三聚体中的应用。

7.权利要求2或3所述的核苷酸序列在制备或表达蛋白质三聚体中的应用。

8.按照权利要求7所述的应用，包括：

(1)将权利要求2或3所述的核苷酸序列与目的基因相连，得到融合基因；二者的

连接次序为：蛋白质三聚体化模序的氨基末端与目的蛋白的羧基末端相连接；

(2)将步骤(1)所得到的融合基因克隆至原核表达载体或真核表达载体，构建得到融

合蛋白原核表达载体或真核表达载体；

(3)将所构建的原核或真核表达载体在体内或体外表达融合蛋白，即得。

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛋白质三聚体化模序，本发明还涉及该蛋白质三聚体化模序在制备

或表达三聚体蛋白质中的应用，属于三聚体蛋白质基因工程领域。

背景技术

卷曲螺旋是一类由两股或两股以上右手α螺旋相互缠绕而形成的平行或反平行的左

手超螺旋结构的总称。卷曲螺旋的特征是，螺旋每圈需要3.5个氨基酸残基，每两

圈形成一个循环，因此形成多个七肽单元的重复序列或称作七重复序列(abcdefg)n。

最常见的天然卷曲螺旋一般由2-5个七重复序列组成(VinsonC，MyakishevM，

AcharyaA，etal.ClassificationofHumanB-

ZIPProteinsBasedonDimerizationProperties.MolCellBiol.2002.22(18)：6321-6335)。

七重复序列各个位置的氨基酸在形成和维持卷曲螺旋结构中发挥不同的作用。其中

a位和d位通常由疏水性氨基酸占据，通常为亮氨酸(Leu)、缬氨酸(Val)或异亮氨酸

(Ile)。a、d位氨基酸构成卷曲螺旋的疏水核心，在维持