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β-抑制蛋白1促进缺氧性肺动脉高压的肺血管胶原合成作用

探讨

周雪;马晶茹

【摘要】目的探讨β-抑制蛋白1（β-arrestin1）对肺动脉高压（pulmonary

arteryhypertension,PAH）肺血管胶原合成的影响,进一步明确PAH肺血管重构

的分子机制。方法20只雄性SD大鼠随机分为对照组（n=10）和低氧组

（n=10）,低氧组大鼠置于低氧舱内（氧浓度100ml/L）3周,正常对照组动物饲

养于常氧动物笼内;右心导管法测定肺动脉平均压（meanpulmonaryarterial

pressure,mPAP）,检测右心室与左心室＋室间隔比值[RV/（LV＋S）];免疫组织

化学和Westernblot方法检测肺动脉中胶原Ⅰ（CollagenⅠ）和β-arrestin1的

表达;沉默β-arrestin1基因,采用Westernblot和免疫荧光方法检测低氧环境下

肺动脉血管平滑肌细胞（pulmonaryarterialsmoothmusclecells,PASMCs）

中CollagenⅠ的表达。结果与常氧组相比,低氧处理组大鼠mPAP[（31.35±1.35）

mmHg]（1mmHg=0.133kPa）以及RV/（LV＋S）（30.81%±0.81%）明显

升高（P〈0.01）,肺血管组织β-arrestin1以及CollagenⅠ的表达水平明显增高;

缺氧能够上调PASMCs中β-arrestin1和CollagenⅠ的表达,沉默β-arrestin1

基因能够抑制缺氧诱导PASMCs胶原合成的作用。结论β-arrestin1促进缺氧条

件下肺血管胶原的合成,促进肺血管的重构,最终导致PAH的形成。

【期刊名称】《解放军医学院学报》

【年(卷),期】2016(037)011

【总页数】5页(P1173-1176,1182)

【关键词】β-抑制蛋白1;肺动脉高压;缺氧;胶原Ⅰ

【作者】周雪;马晶茹

【作者单位】沈阳医学院附属第二医院心血管内科,辽宁沈阳110035

【正文语种】中文

【中图分类】R544.16

肺动脉高压(pulmonaryarteryhypertension，PAH)是以肺动脉压和肺血管阻力

升高为特征的临床血流动力学症候群，通常以平均肺动脉压力在静息状态下＞25

mmHg(1mmHg=0.133kPa)、运动状态下＞30mmHg作为判定标准[1]。肺血

管重构是PAH发病过程中关键的病理变化[2]，因此，探讨PAH肺血管重构的分

子机制，对寻找更有效、更安全的靶向治疗药物，进而解决PAH治疗效果差的问

题具有重要意义。胶原是细胞外基质的重要成分之一，肺动脉中胶原的合成与堆积

在PAH血管重构过程中发挥重要作用[3]。研究表明，缺氧能够诱导胶原的合成

[4]，但其具体分子机制仍待深入

研究。β-抑制蛋白1(β-arrestin1)属于抑制蛋白(Arrestin)家族成员之一，负向调

控G蛋白偶联受体(Gproteincoupledreceptor，GPCR)信号通路[5-6]。最近研

究发现，β-arrestin1能够调控心肌成纤维细胞转化及胶原合成过程[7]。但在缺

氧诱导的PAH病理状态下β-arrestin1能否调控肺血管中胶原的表达，尚无相关

报道。故本实验旨在探讨β-arrestin1在缺氧诱导的PAH动物模型中的表达水平，

分析其与肺血管中胶原合成的关系，阐释PAH中肺血管重构的分子机制。

1主要仪器与试剂低氧舱(OxyCyclermodelA84XOV，美国Biospherix公司)；

Nikon荧光显微镜及图像采集处理系统(日本Nikon公司)；BL-420E生物机能实

验系统(成都泰盟科技有限公司)；大鼠肺动脉血管平滑肌细胞(pulmonaryarterial

smoothmuslecells，PAMCS)(上海江林生物科技公司)；兔抗大鼠β-arrestin1

多克隆抗体及小鼠抗大鼠β-actin单克隆抗体(武汉三鹰生物技术有限公司)、小鼠

抗大鼠CollagenⅠ多克隆抗