原创力文档- 1、本文档共126页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
酶工程
EnzymeEngineering;酶分子定向进化
enzymemoleculardirectedevolution;定向进化
（directedevolution）;分子定向进化;定向进化示意图;概念：模拟自然进化过程（随机变异和自然选择），在体外进行酶基因的人工随机突变，建立突变基因文库，在人工控制条件的特殊环境下，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。
简称酶定向进化（enzymedirectedevolution）;天然酶的局限：酶催化的精确性和有效性常常不能很好地满足酶学研究和工业化应用的要求。
稳定性差
活性低，催化效率低
缺乏有商业价值的催化功能
天然酶的局限性源于酶的自然进化过程。;现代生物工程对酶的要求：
具备长期稳定性和活性
适用于水和非水相环境
能接受不同的底物，甚至是自然界不存在的合成底物
能够在特殊环境中合成和拆分制作新药物或药物的原材料
;酶定向进化的基本过程;授课内容;第一节酶定向进化的特点;第二节酶基因体外随机突变;13/138;;15/138;16/138;17/138;18/138;19/138;;二、DNA重排技术;通过将亲本基因群中的突变尽可能组合在一起,以导致更大的变异,最终获得具有最佳突变组合，属于有性PCR(SexualPCR)。
1994年由Stemmer等首次提出利用该技术使β-内酰胺酶定向进化，催化效率提高32000倍。
;23/138;24/138;25/138;26/138;27/138;28/138;29/138;30/138;31/138;32/138;33/138;34/138;35/138;36/138;37/138;38/138;39/138;40/138;41/138;42/138;43/138;44/138;45/138;46/138;47/138;48/138;49/138;50/138;51/138;52/138;53/138;54/138;55/138;56/138;57/138;58/138;59/138;60/138;同聚加尾法：分别给载体和插入片断加上互补的核苷酸。;衔接物(linker)连接;63/138;64/138;65/138;66/138;67/138;68/138;69/138;70/138;71/138;72/138;73/138;74/138;75/138;76/138;77/138;78/138;79/138;80/138;81/138;82/138;83/138;84/138;85/138;86/138;87/138;88/138;89/138;90/138;91/138;92/138;93/138;94/138;95/138;96/138;97/138;98/138;99/138;100/138;101/138;102/138;103/138;104/138;105/138;106/138;107/138;108/138;;110/138;111/138;112/138;113/138;114/138;115/138;116/138;117/138;118/138;119/138;120/138;121/138;122/138;123/138;124/138;125/138;126/138
文档评论（0）