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长根菇液体菌种生产技术规程

1范围

本标准规定了长根菇液体菌种术语及定义、生产的基本要求、主要包括制作要求、生产工艺流程、

质量要求、技术要求、生产记录与存档。

本标准适用于长根菇液体菌种的生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB5749生活饮用水卫生标准

GB12728食用菌术语

NY/T528食用菌菌种生产技术规程

GB50073洁净厂房设计规范

NY/T2375食用菌生产技术规范

NY/T1731食用菌菌种良好作业规范

3术语和定义

GB/T12728界定的术语和定义适用于本文件。

3.1液体菌种

用液体基质培养的菌种即为液体菌种。

4生产要求

4.1环境条件

应符合NY/T528的规定。

4.2生产车间

应符合GB50073的规定。

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4.3生产原料

培养基生产用水应符合GB5749的要求，化学投入品应符合NY/T2375要求，天然材料要求新鲜、

无霉变、无螨、无虫、洁净、干燥。

4.4菌种选择

选用菌丝生长旺盛、高产、优质、抗逆性强的菌种。

5生产工艺

5.1工艺流程

母种→摇瓶液体菌种→发酵罐液体菌种。

5.2母种制备

5.2.1培养基配方

推荐培养基配方：马铃薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨3g、磷酸二氢钾1.5g，硫酸镁1g，琼脂粉

15g~20g，水1000mL。

5.2.2母种培养基制作

母种培养基按照推荐培养基配方进行配制，装入试管（18mmⅹ180mm或20mmⅹ200mm）中，分装量为试管长度的1/5，使用硅胶塞封口；将试管置于高压蒸汽灭菌锅中，0.1Mpa灭菌30min。将试

管趁热排放在斜面板上冷却。

5.2.3接种与培养

在无菌条件下，用接种钩取黄豆粒大小的初始菌种接种至母种培养基中，24℃~26℃避光培养，

菌丝长满斜面后检验合格即可使用。

5.2.4母种质量要求

培养期间每天检查，及时淘汰染菌或劣势菌种。菌丝长满管后逐支进行感官和菌丝微观特征检验，

合格菌种进入生产流程。

5.3摇瓶液体菌种生产

5.3.1摇瓶液体菌种培养基配方

推荐选用以下配方：

a)配方1：葡萄糖20g/L、豆粕粉5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁1g/L，pH自然；

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b)配方2：玉米粉

20g/L、蛋白胨3g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5g/L，pH自然；

c)配方3：玉米粉20g/L、豆粕粉5g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5g/L，pH自然。

5.3.2培养基配制

按液体培养基配方配制，混合均匀，装入250mL、500mL或1000mL无色玻璃三角瓶中，装液量宜为摇甁容量的1/4，瓶塞封口，并用报纸或牛皮纸包扎，置于高压蒸汽灭菌锅中，在0.1Mpa下灭菌

30min。

5.3.3接种

待培养基冷却至25℃以下，在无菌条件下，用接种铲切取3～5块（3～5）mm×（3～5）mm的母

种块迅速转接于摇甁培养基内，封口。

5.3.4培养

24℃~26℃条件下，静置培养24h，然后置于摇床上震荡暗光培养，转速140r/min～160r/min，

培养时间6d～9d。

5.3.5摇瓶液体菌种质量要求

菌液澄清透明，菌球均匀密集，无异味，镜检无杂菌、菌丝形态正常。

5.4发酵罐液体菌种生产

5.4.1推荐培养基配方

a)配方1：葡萄糖20g/L、豆粕粉5g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、硫酸镁1g/L，消泡剂0.06mL/L，

pH自然；

b)配方2：玉米粉20g/L、蛋白胨3g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5g/L，pH自然；

c)配方3：玉米粉20g/L、豆粕粉5g/L、磷酸二氢钾1g/L、硫酸镁0.5g/L，pH自然。

5.4.2培养基配制

将配制好的培养基材料搅拌均匀，倒入或用泵抽入处理好的发酵罐中，加水定容至所需体积。培养

基投料总量为罐体总容积的60%~80%。拧紧上料口盖，在0.1Ma压力下灭菌40min~60min。

5.4.3接种

灭菌结束后培养基温度冷却至24℃以下，利用