天然药物化学分离精制方法（天然药物化学课件）.pptx

天然药物化学天然药物化学成分的提取分离和鉴定方法色谱法

2六、色谱法广泛应用的一种分离方法一般分离方法无效时待分离物性质相似分不开时仪器化、自动化、高速化

3概念色谱分离法、层析法Chromatography物理化学分析方法

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5基本原理不同成分在固定相和流动相（移动相）中吸附、分配、亲和力存在差异而达到分离

6分类依据----固定相不同氧化铝色谱硅胶色谱聚酰胺色谱凝胶色谱

7分类移动相气相色谱液相色谱

8分类色谱原理不同吸附色谱分配色谱离子交换色谱分子排阻色谱（凝胶色谱）

9分类操作方式柱色谱纸色谱薄层色谱

10(一)吸附色谱成分和固定相---吸附作用流动相和固定相---争夺被成分吸附的固定相

11吸附能力化学吸附---尽量避免硅胶与生物碱，氧化铝与黄酮半化学吸附---可以用聚酰胺与生物碱物理吸附---应用最广无选择性，相似者易于吸附

12常用的吸附剂硅胶微酸性多孔性物质硅氧烷交联结构，硅醇基氢键

13水的影响硅胶的活化、去活化100~110℃加热30分钟不可超过500℃

14氧化铝吸附能力很强的亲水性吸附剂主要用于碱性、中性物质的分离

15聚酰胺商品名绵纶尼龙酚类、醌类物质如黄酮、蒽醌、鞣质

16酰胺基和酚类的羟基、酸类的羧基以及醌类的醌基形成氢键产生吸附

17活性炭非极性吸附剂吸附能力受溶剂影响，水、有机溶剂分离水溶性物质（氨基酸、糖、某些苷）

18提示硅胶：吸附、分配、离子交换作用活性炭：吸附力不易控制聚酰胺：水装柱，小极性的装柱，三氯甲烷

19(二)凝胶色谱凝胶渗透柱色谱法、分子筛滤过柱色谱法、排阻柱色谱法分子量大小不同而分离

20基本原理凝胶颗粒内部凝胶颗粒之间

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22凝胶种类葡聚糖凝胶G-25型含义羟丙基葡聚糖凝胶(SephadexLH-20)

23（三）离子交换色谱离子交换树脂的功能基与溶液中的其他离子进行可逆交换分离混合物中离子成分和非离子成分

24基本原理离子交换树脂：含有解离型功能基团的高分子物质，球状或无定形粒状阳离子交换树脂、阴离子交换树脂

25阳离子交换树脂RSO3-H++Na+Cl-——RSO3-Na++H+Cl-阴离子交换树脂RN+OH-+Na+Cl-——RN+Cl-+Na+OH-

26离子交换树脂的选择综合考虑被分离物质带正电，选择阳离子交换树脂被分离物质带负电，选择阴离子交换树脂

27被分离物质解离能力被分离物质解离能力强，易交换，选择弱酸型或弱碱型树脂被分离物质解离能力弱，不易交换，选择强酸型或强碱型树脂

28被分离物质分子量分子量大，选择低交联度的树脂分子量小，选择交联度大的树脂

29交换容量尽量选择大的粒度通常选200~400目提取离子性成分，100目制备去离子水，16~60目

30（四）大孔吸附树脂色谱白色球形颗粒20~60目非极性中极性极性

31基本原理与离子交换树脂类似而不含交换基团范德华引力、氢键等吸附作用大孔网状结构筛选分离特点

32（五）分配色谱基本原理一种溶剂被惰性固体（支持剂）吸附，另一种溶剂作为流动相，待分离物质在固定相上待分离成分在两溶剂间分配固定相

33正相分配色谱：极性大（水、缓冲液）的溶剂为固定相，极性小（乙酸乙酯、氯仿、丁醇）的溶剂为流动相

34反相分配色谱：极性小（氯仿、石油醚）的溶剂为固定相，极性大（水、甲醇）的溶剂为流动相

35支持剂本身无吸附作用，不溶于两种溶剂，不与被分离物质发生反应，但能吸附一定量的固定相，流动相通过时不改变其组成。

36分离规律正相分配色谱中：被分离组分极性越小，越容易随流动相迁移反相分配色谱中：被分离组分极性越大，越容易随流动相迁移

37操作技术流动相的预饱和直接键合在硅胶上代替液体固定相RP-18RP-8RP-2

38（一）高效液相色谱法原理柱色谱的发展联用七、分离新技术和新方法

39高效、高速、自动操作技术

40广阔的用途分离鉴定定性识别定量分析制备高纯度样品

41实例分析高效液相色谱法固定相ODS（十八烷基硅烷键合硅胶）反相色谱柱流动相甲醇-水

42羟喜树碱R1=R2=OH喜树碱R1=OHR2=H10-甲氧基喜树碱R1=OHR2=OCH3脱氧喜树碱R1=R2=H

43极性顺序羟喜树碱10-甲氧基喜树碱喜树碱脱氧喜树碱洗脱顺序羟喜树碱10-甲氧基喜树碱喜树碱脱氧喜树碱

（二）液滴逆流色谱，DCCC逆流分配法的升级版流动相以液滴形式通过适用于强极性成分的分离不乳化、防止氧化44

45（三）高速逆流色谱高速逆流色谱（High-SpeedCountercurrentChromatography,HSCCC）是一种连续高效的液-液分配色谱分离技术。

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47螺旋分离柱

48特点该技术不需要固体支撑体，主要依据物质在两相中分配系数的不同对物质进行分