有机磷降解菌gz4-1解磷机制及制剂化对苦荞生长的影响.pdf

有机磷降解菌gz4-1的解磷机制及制剂化对苦荞生长的影响

中文摘要

磷作为植物生长过程中不可缺少的元素之一，不仅在植物体内参与光合作用、

呼吸作用、物质储藏与输送等代谢过程，而且对植物根系形成、生长和花芽发育

等具有重要影响。然而，目前已有大量研究表明农作物整个生育过程中的磷肥利

用率较低，导致大量磷肥被土壤固定形成难溶性磷，不仅造成了磷资源的浪费，

而且污染了生态环境。因此，本研究以解磷微生物活化土壤难利用有机磷为出发

点，以实验室保存的可与苦荞根际高效亲和的有机磷高效降解菌B.Vallismortis

gz4-1和苦荞（“晋荞6号”）为实验材料，一方面为从代谢层面揭示gz4-1代

谢物与解磷活性之间的互作关系，采用LC-MS/MS技术对菌株gz4-1发酵过程中

的代谢物变化进行了分析，并在完成代谢物种类注释后，采用相关性分析对菌株

gz4-1发酵过程中的代谢物相对峰面积与菌株解磷活性进行了偶联分析，旨在鉴

选出与菌株gz4-1解磷活性显著相关的代谢物种类，进而从代谢角度阐释菌株

gz4-1有机磷降解机制；另一方面，为实现菌株gz4-1的制剂化应用。本研究首

先以菌株存活率和苦荞种子萌发率为筛选指标采用单因素试剂对2种剂型加工

过程中的配方成分进行了鉴选；其次，通过正交试验对2种剂型配方进行了深入

优化；最后通过盆栽试验对制剂解磷应用效果进行了验证，旨在为后期菌株gz4-1

的转化应用和苦荞低磷栽技术开发提供配套产品。取得了如下结果：

（1）以空白培养液为对照，采用LC-MS/MS技术在扣除空白发酵液中相关

物质后可从菌株gz4-1代谢物中共鉴定出360种代谢物，且通过偶联分析可从360

种代谢物鉴选32种物质与菌株gz4-1解磷活性显著正相关，说明菌株gz4-1主要

是通过分泌有机酸来实现有机磷活化。

（2）以活菌数量、解磷活性和苦荞种子发芽率为评价指标，通过单因素生

物相容性试验对种衣剂和拌种剂的较优载体、助剂种类及用量进行了筛选，结果

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表明：硅藻土作为载体最好，其吸附量为4.66mL/g，活菌数为1.24×10cfu/g，

湿润时间为3.94s，可溶性磷含量达到5.47mg/L，苦荞种子萌发最快；种衣剂成

膜剂选择6%羧甲基纤维素钠和2%海藻酸钠复配最好，此时可溶性磷含量为6.75

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mL/g，活菌数量为1.83×10cfu/g，7d苦荞种子全部萌发；拌种剂分散剂选择8%

羧甲基纤维素钠、8%木质素磺酸钠、2%聚乙烯醇和8%木质素磺酸钙最好，此

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时可溶性磷含量为9.36mg/L，活菌数量为2.11×10cfu/g，7d苦荞种子全部萌发；

拌种剂湿润剂选择10%拉开粉BX、2%SDS和6%渗透剂T最好，活菌数量为

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2.08×10cfu/g，7d苦荞种子全部萌发。

（3）得到花域芽孢杆菌gz4-1种衣剂的较优配方为发酵液72%、硅藻土16%、

羧甲基纤维素钠8%、海藻酸钠2%、碱性品红2%；在该配方下不仅菌株gz4-1

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的活菌数量为1.51×10cfu/g、可溶性磷含量为8.95mg/L同对照活菌数量为

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1.50×10cfu/g、可溶性磷含量为8.91mg/L相比差异不显著，而且苦荞种子萌发

率可达100%，与对照无显著差异。花域芽孢杆菌gz4-1拌种剂的较优配方为发

酵液59%、硅藻土13%、羧甲基纤维素钠10%、木质素磺酸钙8%、木质素磺酸

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钠8%、聚乙烯醇2%；在该配方下菌株gz4-1的活菌数量可达1.56×10cfu/g、可

溶性磷含量可达9.24mg/L，且可使苦荞种子发芽率保持在100%，同对照相比差

异不显著。

（4）通过田间试验对菌株gz4-1种衣剂和拌种剂的用量及应用效果进行了

研究，结果表明：苦荞种子在播种前经菌株gz4-1不同用量种衣剂和拌种剂处理