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CCL2通过纤毛调控脂肪前体细胞分化的作用及其分子机制.pdf

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山东师范大学硕士学位论文

目录

摘要I

AbstractIII

第一章引言1

1.1脂肪组织概述1

1.1.1脂肪组织类型和功能1

1.1.2SVF2

脂肪组织基质血管组分()

1.1.3脂肪组织重塑2

1.1.4脂肪组织扩张方式3

1.1.5脂肪细胞生成4

1.1.6脂肪组织炎症5

1.2初级纤毛调节脂肪组织能量储存7

1.2.1初级纤毛简介7

1.2.2初级纤毛—脂肪前体细胞的生物标志8

1.2.3抑制脂肪形成的纤毛信号通路9

1.2.4促进脂肪形成的纤毛信号通路9

1.3CCL2-CCR2信号轴11

1.3.1趋化因子及其受体11

1.3.2CCL2-CCR2信号与相关疾病12

1.4研究目的和意义14

第二章材料与方法15

2.1实验材料15

2.1.1细胞系15

2.1.2siRNA15

2.1.3质粒15

2.1.4感受态15

山东师范大学硕士学位论文

2.1.5抗体与药品16

2.1.6实验试剂17

2.1.7实验仪器18

2.1.8实验主要试剂的配制19

2.2实验方法22

2.2.1细胞培养22

2.2.2脂肪组织SVF分离22

2.2.3脂肪前体细胞体外成脂诱导程序23

2.2.4免疫荧光染色24

2.2.5油红染色细胞脂滴24

2.2.6免疫印迹24

2.2.7免疫沉淀25

2.2.8质粒的扩增与构建25

2.2.9转染28

2.2.10RNAqPCR30

总提取及检测

2.2.11免疫组化31

2.2.12数据统计分析32

第三章实验结果34

3.1高脂饮食刺激下SVF能够通过旁分泌促进脂肪前体细胞分化34

3.2SVF旁分泌作用于脂肪前体细胞上的纤毛从而促进脂肪前体细胞分化36

3.2.1敲低纤毛发生关键基因IFT88导致共培养不能促进分化36

3.2.2抑制纤毛的形成导致共培养促分化作用消失37

3.3高脂饮食喂养下,脂肪组织SVF分泌的促炎因子CCL2能够促进脂肪前体细胞分化39

3.3.1SVFCCL239

高脂喂养的小鼠内脏及皮下脂肪组织中表达均上调

3.3.2促炎因子CCL2能够促进脂肪前体细胞分化40

3.4CCL2通过脂肪前体细胞纤毛上的受体CCR2促进分化41

3.5CCL2

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