Mcl-1蛋白荧光探针的设计、合成及分析应用.pdfVIP

目录

摘要I

AbstractIII

第一章绪论1

1.1引言1

1.2Mcl-1蛋白的结构及生物学功能1

1.2.1Mcl-1蛋白的结构1

1.2.2Mcl-1蛋白的生物学功能2

1.3Mcl-1蛋白检测方法和技术研究进展4

1.3.1免疫组化染色和免疫印迹法4

1.3.2荧光蛋白检测法6

1.3.3荧光探针检测法7

1.4生物正交荧光探针的研究进展9

1.5论文选题的目的及意义14

第二章基于BODIPY的Mcl-1蛋白标记探针设计合成及应用15

2.1引言15

2.2实验部分15

2.2.1实验仪器与试剂15

2.2.2探针的设计与合成16

2.2.3溶液的配制19

2.2.4探针的光物理性质检测20

2.2.5ELISA实验21

2.2.6细胞毒性实验22

2.2.7细胞培养与成像22

2.2.8细胞凋亡实验22

2.2.9斑马鱼活体实验23

2.3结果与讨论23

2.3.1探针的光物理性质23

2.3.2探针的稳定性实验24

2.3.3探针的特异性27

2.3.4细胞毒性评价28

2.3.5Mcl-1蛋白特异性成像28

2.3.6细胞成像29

2.3.7细胞凋亡实验30

2.3.8斑马鱼活体成像30

2.4小结31

第三章基于点击化学的Mcl-1蛋白标记探针设计合成及应用32

3.1引言32

3.2实验部分32

3.2.1实验仪器与试剂32

3.2.2探针的设计与合成33

3.2.3溶液的配制36

3.2.4探针的响应性能测试37

3.2.5点击反应机理验证39

3.2.6探针的特异性验证39

3.2.7细胞毒性实验40

3.2.8细胞培养与成像40

3.2.9细胞凋亡实验41

3.2.10斑马鱼活体实验41

3.3结果与讨论41

3.3.1探针的响应性评价41

3.3.2反应动力学42

3.3.3pH的影响43

3.3.4探针的选择性评价43

3.3.5点击反应机理验证45

3.3.6探针的特异性46

3.3.7细胞毒性评价47

3.3.8Mcl-1蛋白特异性成像48

3.3.9细胞成像49

3.3.10细胞凋亡实验50

3.3.11斑马鱼活体成像51

3.4小结52

第四章总结与展望53

参考文献54

附录化合物的表征图谱62

攻读硕士学位期间所获科研成果74

致谢75

摘要

髓细胞