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离心法硝酸纤维素滤膜法第四节影响微生物生长的主要因素影响酶活性影响细胞膜的流动性影响物质的溶解度。一、温度对微生物生长的影响从微生物整体来看:生长的温度范围一般在-10℃~100℃但对于特定的某一种微生物:只能在一定温度范围内生长,在这个范围内,每种微生物都有自己的生长温度三基点,即最低、最适、最高生长温度低温型微生物中温型微生物高温型微生物根据微生物的最适生长温度的不同,可将微生物划为三个类型:粘质赛氏杆菌的生长最适温度为37℃,而合成灵杆菌素的最适温度为20~25℃;黑曲霉生长最适温度为37℃,而产糖化酶的最适温度则是32~34℃;以青霉素的生产为例:培养165小时采用分段控制温度的方法,其青霉素产量比始终在30℃培养提高了14.7%。30℃25℃20℃25℃0h5h40h125h165h微生物不同生理活动要求不同温度,所以最适生长温度≠发酵速度快、积累代谢产物多。二、氧气对微生物生长的影响微生物对氧的需要和耐受力在不同的类群中变化很大,根据微生物与氧的关系,可把它们分为几种类群:专性好氧菌好氧菌微好氧菌兼性厌氧菌耐氧厌氧菌厌氧菌(专性)厌氧菌专性好氧菌(strictaerobe)只能较低的氧分压下才能正常生长,通过呼吸链并以氧为最终氢受体而产能,必须在有分子氧的条件下才能生长,有完整的呼吸链,以分子氧作为最终氢受体,细胞含有超氧物歧化酶(SOD,superoxidedismutase)和过氧化氢酶。微好氧菌(microaerophilicbacteria)在有氧或无氧条件下均能生长,但有氧情况下生长得更好,在有氧时靠呼吸产能,无氧时接发酵或无氧呼吸产能;细胞含有SOD和过氧化氢酶。兼性好氧菌(facultativeaerobe)耐氧菌(aerotolerantanaerobe)01不具有呼吸链,依靠专性发酵获得能量。细胞内存在SOD和过氧化物酶,但缺乏过氧化氢酶。02厌氧菌(anaerobe)03分子氧对它有毒害,短期接触空气,也会抑制其生长甚至致死;细胞内缺乏SOD和细胞色素氧化酶,大多数还缺乏过氧化氢酶。04三、pH微生物的生长pH值范围极广,从pH2~10都有微生物能生长。绝大多数种类都生活在pH5.0~9.0之间。各种微生物都有其生长的最低、最适和最高pH值。最低最适最高细菌放线菌5.07.0~8.010.0酵母菌2.54.0~5.88.0霉菌1.53.8~6.07.0~11.001020304同一种微生物在其不同的生长阶段和不同的生理生化过程中,对pH值的要求也不同。举例:在发酵工业中,控制pH值尤其重要,Aspergillusniger在pH2~2.5范围时有利于合成柠檬酸,当在pH2.5~6.5范围内时以菌体生长为主,而在pH7.0时,则以合成草酸为主。05丙酮丁醇梭菌在pH5.5~7.0范围时,以菌体生长为主,而在pH4.3~5.3范围内才进行丙酮丁醇发酵。生长的最适pH值与发酵的最适pH值灭菌(sterilization)采用强烈的理化因素使物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。如高温。消毒(disinfection)采用较温和的理化因素,杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的病原菌,而对被处理物体基本无害的措施。如75%酒精。一、基本概念第五节有害微生物的控制②间接法-平板菌落计数法原理:每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。特点:最为常用,只计活菌数,但操作较烦琐且要求操作者技术熟练。改进技术:现在已出现多种微型、快速、商品化的用于菌落计数的密封琼脂板。原理是利用活菌批示剂TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑),它可使菌落在很微小时就染成易于辨认的玫瑰红色。常用该法测定含菌量较少的空气和水中的微生物数目。将定量的样品通过薄膜(硝化纤维素薄膜、醋酸纤维薄膜)过滤,菌体被阻留在滤膜上,取下滤膜进行培养,然后计算菌落数,可求出样品中所含菌数。间接法--薄膜过滤计数法原理:在一定范围内,菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌数越多,光密度越大。因此,借助于分光光度计,在一定波长下测定菌悬液的光密度,就可反应出菌液的浓度。特点:快速、简便;但易受干扰。②间接法-比浊法将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来,然后烘干(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。(微生物的干重一
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