细菌和噬菌体的遗传重组.pptVIP

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2025-01-25 发布于上海
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细菌和噬菌体的遗传重组.ppt

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第六章

细菌和噬菌体的遗传重组第一节细菌杂交的关键因子1、F因子(致育因子)的结构与功能三个基因丛：原点插入基因转移基因负责DNA的转移与细菌结合有关与性繖毛的形成有关复制基因trp复制蛋白inc决定不相容基因oriv复制起点2、F因子在E·coli中的存在形式整合(成为染色体的一部分）高频重组品系（Hfr品系）——与F-菌株杂交时,重组子出现的频率几乎比F+高上1000倍。F-F+HfrF因子整合过程(P226)F因子的切离游离(与染色体相独立)F-F+第二节细菌的连锁图

——把细菌染色体的相对基因位子标识出来01中断杂交02重组作图1、中断杂交F因子的转移接合（核酸内切酶）断链向F-cell转移并复制转移的链在F-中合成双链DNA转移和合成完成，连接酶封闭缺口HfrF-Thr+leu+azirtonrlac+gal+strs(2x107)Xthr-leu-azistonslac-gal-strr(4x108)↓肉汤培养液中通气培养↓定期取样（隔二分钟一次）↓组织捣碎器搅拌2‘4’6‘8’10‘12’（鉴定菌落的基因型）MM+STRHfr中非选择性标记进入F－所需时间转移Hfr基因时间09azir9azirtonr11azirtonrlac+18azirtonrlac+galr25越早出现，越接近原点。不是以1％重组值为图距，而是以时间为图距。混合两种亲本后的时间2、重组作图供体仅仅提供一个染色体片段，而受体提供完整的染色体。供体受体部分二倍体（部分合子体）外基因子内基因子只有偶次交换才能进行稳定的重组。一次重组仅得一种重组子。（1）特点（2）作图重组值＝重组子／总菌落数X100％＝lac-ade+／［(lac+ade+)+(lac-ade+)］X100%＝22%Hfr品系不同主要是由于F因子插入的位置，方向不同，导致与F-杂交的起点不同。第三节噬菌体的遗传重组（一）遗传重组现象噬菌体T2的两对性状h：寄主范围h+→E.coliB／(B/2)噬菌斑半透明突变型h→E.coliB／(B/2)噬菌斑透明r:噬菌斑形态r+→小噬菌斑，周围有朦胧光环突变型r→大噬菌斑，边缘清晰hr+Xh+r（放在E.coliB平板上生长——混合感染）↓E.coliB↓子代噬菌体→混合平板(E.coliB和E.coliB/2)→四种噬菌斑＝重组噬菌斑数／总数X100％01＝(h+r++hr)／总噬菌斑数02重组值