乳酸菌吸附纳米微塑料的研究.pdfVIP

摘要

微/纳米塑料（Micronanoscaleplastics，MNPs）作为一种新型污染物，人类很容易

从食物包装、盐、饮用水中摄取，已在各种水环境中被广泛检测到，且极易成为其他小

分子污染物的载体，严重威胁人类健康。目前有大量的文章研究了MNPs的来源、途径

及危害，但对于MNPs的去除及机制的研究还处于起步阶段。根据以往的研究发现，乳

酸菌可以有效去除多环芳烃、真菌毒素、杂环胺和重金属等有毒化合物，乳酸菌吸附去

除MNPs的研究还未见报道。因此，本研究主要探究了NPs、镉（Cadmium，Cd）、邻

苯二甲酸二丁酯（Dibutylphthalate，DBP）单一污染物及复合污染物暴露下，人体肠道

细菌群落多样性及代谢功能的变化；检测了乳酸菌对聚丙烯（Polypropylene，PP）、聚

乙烯（Polyethylene，PE）、聚氯乙烯（Polyvinylchloride，PVC）三种NPs的耐受能力，

以及NPs对乳酸菌菌株生物膜形成的影响；探究了乳酸菌对NPs的吸附效果和吸附机

制，及其在模拟胃肠道消化系统中的应用。主要获得如下创新性结果：

1.NPs-Cd-DBP对人体肠道微生物群落组成及代谢功能的影响

(1)探究了NPs-Cd-DBP单一污染及复合污染对人体肠道微生物群落组成影响。与

对照相比，单一污染的优势菌属无明显变化，主要为肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、

乳杆菌属（Lactobacillus）、巨型球菌属（Megasphaera）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）

等；在复合污染PP+Cd和PP+DBP+Cd两组中优势菌属有显著差异，其中乳杆菌属的

相对丰度分别升高至97%和83%，样品属水平多样性显著下降。复合污染中柯林斯菌

属（Collinsella）、梭菌属（Clostridium）、巨型球菌属（Megasphaera）等致病菌以共

生关系与周围细菌互作；乳杆菌属（Lactobacillus）与周围节点均为负相关关系（100%），

说明乳杆菌属（Lactobacillus）对污染物有较强的耐受能力，多以竞争关系与周围细菌

互作。

(2)与对照无处理组相比，无论是单一污染还是复合污染暴露，均使肠道菌群的氨

基酸代谢发生改变，大多数氨基酸的含量显著增加。由此说明，不同污染物处理均会影

响氨基酸代谢。与对照组相比，肠道微生物产生丁酸和戊酸的量在单一污染暴露下有所

I

升高，在复合污染暴露下，丁酸和戊酸的含量显著下降。以上述结果可知，添加NPs、

重金属Cd、塑化剂DBP后对肠道微生物代谢产物SCFAs的含量有显著影响。

2.乳酸菌对NPs及复合污染物的耐受能力

从人体粪便和发酵食品中分离得到5株不同乳酸菌菌株，其中植物乳杆菌ZP-6对

于NPs的耐受能力最好。通过场发射电子显微镜观察发现，NPs稳定吸附在植物乳杆菌

表面，使细胞表面变得粗糙，但细胞形态未发生变化；通过96孔板半定量法测定和扫

描电镜观察发现NPs单一污染及NPs-Cd复合污染下菌株ZP-6分泌胞外聚合物使菌体

相互粘连，形成生物膜；通过对胞外聚合物组分（胞外蛋白、多糖）的测定发现，单一

污染和复合污染下均能增加菌体细胞胞外蛋白和多糖的含量，其中复合污染含量最高；

通过对污染暴露体系Zeta电位的测定发现，复合污染时Zeta电位绝对值降低，原因是

2+

带正电荷的Cd与带负电荷的菌体结合时发生电荷转移，菌体表面的静电排斥力随之变

小，更有利于菌体黏附NPs。综上所述，植物乳杆菌ZP-6对于NPs-Cd污染具有一定的

耐受能力。

3.乳酸菌吸附NPs的条件优化及机制分析

分离筛选得到一株对PP吸附效果良好的菌株——植物乳杆菌ZP-6，并从吸附时间、

pH值、NPs浓度3方面进行条件优化。结果表明当吸附时间4h、NPs浓度10μg/mL、

pH6时，ZP-6对3种NPs（PP、PE、PVC)的吸附效果最好，PP、PE、PVC的吸附率

分别可达到78.57%，71.59%和66.57%。通过对疏水性的测定发现，NPs疏水性越大，

尺寸越小，NPs越容易被菌体细胞吸附结合；对比细胞壁不同组分对NPs的吸附作