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（二）两点终点法二点终点法也称固定时间法，它可以用一种或二种试剂。单试剂二点法，在样品与试剂混合后的延滞期后读取A1，一定时间后读取A2，A=A2-A1。双试剂二点法，属于试剂启动法，原理是加入样品—试剂1—读取A1，加入试剂2—读取A2，也是读取两次吸光度，第一次是相当于读出样品空白的值，加入试剂2至第二次读数才是实际呈色反应，因此A=A2-kA1。特点：可以消除样品、试剂的颜色、浊度，和一些干扰物质对测定的干扰。第70页,共83页，星期六，2024年，5月第71页,共83页，星期六，2024年，5月3.比浊法比浊法也是一种终点法．不过是一种浊度测定，比浊法可用于化学比浊法和免疫比浊法。免疫比浊法又分为透射比浊和散射比浊目前常用的免疫比浊法主要用于血清特种蛋白的检测，如载脂蛋白、微量蛋白、急性时相反应蛋白，免疫球蛋白等，以及某些药物监测。第72页,共83页，星期六，2024年，5月光学系统功能:提供足够强度的光束、单色光及比色的光路。组成:由光源、光路系统、分光器、比色杯等组成。第38页,共83页，星期六，2024年，5月光源：一般采用卤素灯(多为12V20W)，寿命为800小时左右，提供波长范围为325nm～800nn的光源。第39页,共83页，星期六，2024年，5月光路系统：定义:从发出光到信号接收的全部路径。组成:由一组透镜、聚光镜、比色杯和分光元件等组成第40页,共83页，星期六，2024年，5月光路的分类：直射式光路和集束式光路集束式光路的优点：使光束变窄，可检测低于180μl的反应液，使生化分析仪的超微量检测成为可能第41页,共83页，星期六，2024年，5月前分光光路和后分光光路后分光的优点：①可同时选用双波长或多波长进行测定，提高了分析的精度和准确度；②不需调节仪器的任何部件，降低了噪声，，减少了故障率。第42页,共83页，星期六，2024年，5月反射式光路：特点：①在干化学化分析仪中使用。②载体是固相的试纸，不具备透射功能，反光度与浓度成反比。第43页,共83页，星期六，2024年，5月分光元件分类:滤光片、棱镜、全息反射式光栅和蚀刻式凹面光栅滤光片均为干涉滤光片，有插入式和可旋转式滤光片槽、滤光片盘两种。全息反射式光栅是在玻璃上覆盖一层金属膜后制成，有一定程度的相差，易被腐蚀。蚀刻式光栅是将所选波长固定地刻制在凹面玻璃上(1mm内可以蚀刻4000～10000条线)，有耐磨损、抗腐蚀、无相差等优点第44页,共83页，星期六，2024年，5月比色杯比色杯的厚度有0.5cm、0.6cm和1cm三种。光径小的可以减少样品和试剂用量。光径小于1cm时，仪器可以自动校正为1cm。第45页,共83页，星期六，2024年，5月比色杯有二种类型：2、反应杯兼作为比色杯：反应杯以不同形式逐个连接在一起，形成一个盘结构，按指定顺序通过光路，进行连续比色。1、流动比色池:吸液器将试管内的有色溶液吸入固定的比色杯，进行比色后再吸出，此为单通道比色方式。第46页,共83页，星期六，2024年，5月信号检测系统功能：是接收由光学系统产生的光信号，将其转换成电信号后放大，再把它们传送至数据处理单元。信号接收器：一般为硅(矩阵)二极管信号传送方式：光电信号传送和光导纤维传送两种第47页,共83页，星期六，2024年，5月进样、加液系统功能：模仿人工操作，识别样品和试剂，并把它们加入到反应器中。样品架(盘)和试剂盘加液系统搅拌器组成：单通道全自动生化分析仪第48页,共83页，星期六，2024年，5月第49页,共83页，星期六，2024年，5月第50页,共83页，星期六，2024年，5月第51页,共83页，星期六，2024年，5月多通道全自动生化分析仪第52页,共83页，星期六，2024年，5月反应系统组成：反应盘和恒温系统两部分。反应盘反应盘是生化反应的场所，全部的反应杯位于其中，目前的全自动生化分析仪都用反应杯兼作比色杯，置于恒温箱中。第53页,共83页，星期六，2024年，5月恒温系统自动生化分析仪通过恒温系统保持温度的恒定，以保证反应的正常进行，其保持恒温的方式有干式恒温、水浴循环加热式、恒温液循环间接加热式三种：第54页,共83页，星期六，2024年，5月清洗系统组成：一般由吸液针、吐液针和擦拭块组成，可有五至九段清洗，段就是冲洗的步骤。清洗的工作流程：吸出反应液吐入清洗剂吸干吐入去离子水吸干擦干→→