有机合成纯化硅胶柱层析.ppt

3．吸附剂的活度及其调节吸附剂的活性取决于它们含水量的多少，活性最强的吸附剂含有最少的水。吸附剂的活性一般分为五级，分别用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ表示。数字越大，表示活性越小，一般常用Ⅱ～Ⅲ。向吸附剂中添加一定的水，可以降低其活性。反之，如果用加热处理的方法除去吸附剂中的部分水，则可以增加其活性，后者称为吸附剂的活化。第33页,共34页，星期六，2024年，5月4、实验操作吸附剂用量的确定→柱子的选择→装柱→柱留体积的测量→加样或拌样→洗脱→分部收集→检测→合并→浓缩硅胶：吸附色谱——1g样品/20～50g，特例1g样品/500～1000g，用前最好120oC烘24h，可不做活性测定。分配色谱——1g样品/100～1000g，特例1g样品/10000g。第34页,共34页，星期六，2024年，5月有机合成纯化硅胶柱层析色谱法

薄层色谱法(TLC)基本原理TLC定义：把吸附剂铺在玻璃板上，将样品点在其上，然后用溶剂展开，使样品中各个组分相互分离的方法。这是一种简便、快速、微量的分离分析技术，其应用范围非常广泛。分类：吸附薄层色谱、分配薄层色谱、离子交换薄层色谱、分子筛薄层色谱等。第2页,共34页，星期六，2024年，5月吸附薄层色谱基本原理：不同物质与吸附剂（固定相）之间的吸附力不同；不同物质在溶剂（流动相）中的溶解度不同；当达到吸附和溶解（解吸）平衡时，不同的物质在固定相和流动相之间便具有不同的质量分配比或平衡常数（K）。这一过程相当于一次固—液萃取。当流动相的向前移动时，相当于固—液萃取的固液分离。流动相中因含有较多的吸附力小、溶解性大的成分，因此，相当于对此成份进行了一次富集。到达前方的各成分会在新位置于固定相和流动相之间的重新形成分配平衡。同时，原位置残留的各成分因新鲜溶剂的到来也会在原位置重新形成分配平衡。此时相当于对原材料进行二次萃取。只要移动相是连续的，那么对原位置各成分的“萃取”也就是不断的。经过多次“萃取”之后，原位置的易溶成分优先被萃取完全，残留的将是吸附力强、溶解相差的成分。这样便达到了分离的目的。第3页,共34页，星期六，2024年，5月分配薄层色谱的原理：

相当连续多次的液—液萃取。与吸附色谱不同的是固定相和流动相均是液体，固定相的液体由其它固体材料（支持剂、载体或担体）来支持或载附，不随流动相的移动而移动。因此，物质的分离是依靠不同的物质在固定相和流动相之间以不同的分配系数（K）连续不断地形成分配平衡而实现的。

物质在薄层板上移动速度常用Rf值（比移值）表示，其定义是：第4页,共34页，星期六，2024年，5月第5页,共34页，星期六，2024年，5月影响Rf值的因素：薄层的厚度吸附剂的种类、粒度、活度（吸附能力）展开剂的纯度、组成及挥发性展开方式（上行或下行）展开缸的形状、大小及饱和程度外界温度等。第6页,共34页，星期六，2024年，5月Rf的特性和应用：在固定条件下，特定化合物的Rf值是一个常数。因此，在条件完全相同的情况下，Rf值可以作为该化合物定性检定的物理指标，就像测定熔点或其它物理常数一样。为了获得相同的色谱条件，通常是把未知样和标准样同时滴加在同一块薄板上。第7页,共34页，星期六，2024年，5月（二）、吸附剂

吸附色谱：

?最常用的吸附剂有硅胶、氧化铝，粒度一般为150~300目筛孔，其次是聚酰胺和纤维素，其粒度一般分别为70~140目筛孔和160~200目筛孔。

?氧化铝的极性比硅胶大，比较适用于分离极性较小的化合物（烃、醚、醛、酮、卤代烃等）；相反，硅胶适用于分离极性较大的化合物（羧酸、醇、胺等）。第8页,共34页，星期六，2024年，5月分配色谱支持剂：硅胶、硅藻土、纤维素等。固定相：水、甲酰胺、石蜡油等。薄层粘合剂及其他添加剂石膏（10—15%）、羧甲基纤维素钠（CMC）（0.5—1%）、淀粉（5%）、聚乙烯醇（0.5—1%）等。添加1.5%的硅酸锌锰（Zn2SiO4∶Mn），制成荧光板。加入硝酸银可制成硝酸银薄板，用于分离含π键的顺、反异构体。添加硼酸制成的薄层板则可以分离单糖类化合物异构体。第9页,共34页，星期六，2024年，5月（三）、展开剂及其选择大原则：选择展开剂一般需要针对吸附剂的种类、活度和被分离混合物的组成及各成分的性质结构和性质等情况综合而定。小原则：被分离物质和展开剂之间的极性关系应符合“相似相溶原理”。该原则可用于确定展开剂的大致范围。第10页,共34页，星期六，2024年，5月单一溶剂的极性顺序为（从小到大）：石油醚→环己烷→四氯化碳→三氯乙烯→苯→甲苯→二氯甲烷→氯仿→乙醚→乙酸乙酯→乙酸甲酯→丙酮→正丙醇→甲醇→吡啶→乙酸