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BGN基因在肾透明细胞癌进展与转移中的作用机制研究

中文摘要

背景肾透明细胞癌（clearcellrenalcellcarcinoma,ccRCC）是最常见的肾癌亚型，

早期临床表现不明显，绝大多数患者是通过体检发现的，有些患者发现时已经出现

远处转移的情况。因此寻找有效的分子靶点对于早期发现肾透明细胞癌、改善患者

预后具有重要意义。双糖链蛋白聚糖（Biglycan,BGN）属于富含亮氨酸的小蛋白多

糖家族(smallleucine-richproteoglycans,SLRP)的I类成员之一，参与胶原纤维的搭建

并介导细胞信号传导，是细胞外基质的重要成分，其过表达与肿瘤侵袭及不良预后

有关。但BGN在肾透明细胞癌进展和转移过程中的作用尚不清楚，因此，本项目利

用生物信息学结合细胞实验进一步探究BGN基因在肾透明细胞癌进展和转移过程

中的作用及机制。

方法收集TCGA、GTEX、GEO数据库关于BGN的数据信息并利用R语言及SPSS

进行差异分析、生存曲线分析及临床相关性分析。肿瘤与癌旁组织中BGN的表达

水平通过实时荧光定量PCR技术和HPA数据库中的免疫组化结果进行验证。此

外，我们通过CCK-8、克隆形成、划痕实验、Transwell实验分析了BGN对肾透明

细胞癌细胞系Caki-1和786-0的增殖、侵袭的影响。最终通过RNA测序、GO-KEGG

分析、GSEA分析、DO分析等进行差异基因分析，并利用免疫蛋白印迹实验

（WesternBlot，WB）实验验证BGN通过JNK信号通路发挥作用。

结果从数据库分析结果来看，与正常组织相比，BGN在多种肿瘤中的表达都有所

增加。而且和多种肿瘤的预后不良有关。根据TCGA、GTEX、GEO等数据库数

据分析和PCR结果分析显示，与正常肾组织相比，BGN在肾透明细胞癌组织中的

表达明显增多，且与临床预后不良有关。此外，我们进一步通过CCK-8实验验证

BGN敲减慢病毒的感染的肾透明细胞癌细胞Caki-1和786-0的细胞生长速度较对

照组降低。克隆形成实验结果表明BGN敲减后细胞增殖能力降低。Transwell实验

结果表明敲减BGN组细胞的侵袭能力较对照组下降。划痕实验结果表明敲减BGN

组细胞的细胞迁移能力较对照组有明显下降。最后，我们对敲减BGN后的Caki-1

细胞系进行了转录组测序。GO分析结果显示这些基因参与血管发育、血管形态形

成、泌尿生殖系统发育、细胞增殖等多个生物学过程；KEGG分析差异基因与包括

基底细胞癌、MAPK信号通路、癌症通路、轴突引导等机制相关；DO分析结果显

示BGN表达与癌症、肾脏疾病、泌尿系统疾病等相关。GSEA分析结果显示：BGN

主要参与DNA复制、皮肤表皮结构、ATP转运、氧化磷酸化等通路。对BGN敲减

后的肾透明细胞癌细胞系进行MAPK信号通路关键蛋白的验证，发现BGN通过JNK

信号通路发挥作用。

结论BGN基因在肾透明细胞癌中表达升高，且与ccRCC患者的不良预后相关。BGN

通过JNK信号通路介导肾透明细胞癌的增殖、迁移及侵袭能力。综上，BGN有望

成为ccRCC患者的预后指标和潜在的治疗靶点。

硕士研究生：夏汉清（泌尿外科学）

指导教师：王新生（教授）

关键词：肾透明细胞癌；双糖链蛋白聚糖；生物信息学；MAPK信号通路

EffectandMechanismofBiglycanontheProgressionandMetastasis

ofClearCell