遗传咨询师课件：---配子源性糖尿病-黄荷凤.pptx

配子源性糖尿病

黄荷凤

上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院

教育部生殖遗传重点实验室（浙江大学）

目的：明确宫内高糖环境所致成年期疾病的发病风险及隔代遗传效应。研究子

一代及子二代的胰岛功能、胰岛细胞重要印记基因表达以及差异甲基化区

（DMR）的甲基化状况，评估宫内高糖子代及隔代发生甲基化异常的风险，探

索胰岛功能、印记基因表达与甲基化的关系。

材料和方法：建立妊娠期糖尿病（GDM）小鼠传代模型。将对照组（C）及GDM

出生子一代雌雄小鼠两两1:1自然交配，出生子二代小鼠（C♂-C♀,GDM♂-C♀,

C♂-GDM♀,GDM♂-GDM♀)。检测体重、空腹及餐后随机血糖水平、胰岛素水

平、糖耐量等。用胆总管穿刺灌注胶原酶方法分离纯化小鼠胰岛细胞，体外葡萄

糖刺激胰岛素释放实验检测胰岛功能，对与胰岛细胞发育及糖尿病发病密切相关

的印记基因Igf2、H19及Plagl1行实时定量PCR检测。亚硫酸氢盐测序法检测

小鼠胰岛Igf2DMR0、Igf2DMR1、Igf2DMR2和H19DMR的甲基化状态。实

时定量PCR检测子一代小鼠精子细胞Igf2、H19表达。

结果：宫内高糖环境出生的子一代小鼠3周龄和8周龄的体重与对照组无显著差

异，虽然生长早期（3周龄）糖耐量正常，但在8周龄时出现糖耐量异常；子二代

小鼠GDM♂-C♀及GDM♂-GDM♀组出生体重显著增加，具有明显的亲源性遗传

效应，3周龄和8周龄的体重与对照组无显著差异，但是在3周龄就发生糖耐量异

常，至8周龄时糖耐量仍然异常；子一代及子二代雄鼠糖耐量异常表型均较雌鼠

更加明显。宫内高糖环境出生子一代及子二代小鼠胰岛细胞表现为葡萄糖刺激后

胰岛素释放功能受损，Igf2及H19基因表达均显著低于对照组，Plagl1基因表达无

明显改变；子一代和子二代雄鼠胰岛印记基因表达异常均较雌鼠更加明显。在对

照组中，Igf2DMR2和H19DMR均表现为差异甲基化，而F1-GDM及

GDM♂-GDM♀组中Igf2DMR2和H19DMR的甲基化程度均较对照组明显增高。

宫内高糖环境出生子一代雄鼠，无论糖耐量异常还是糖耐量正常，精子细胞Igf2

及H19表达均降低。

结论：宫内高糖环境出生子一代及子二代小鼠出生体重及糖代谢状况异常，子代

雄鼠糖耐量异常表型较雌鼠更加明显且具有亲源性遗传特征，提示表观遗传机制

在子代及隔代疾病发生中起重要作用。宫内高糖环境出生子代小鼠胰岛Igf2/H19

差异甲基化区中Igf2DMR2和H19DMR的甲基化水平增高所致印记基因Igf2、

H19表达降低，可能为胰岛细胞功能异常的机制之一。宫内高糖环境出生子一代

雄鼠精子细胞Igf2及H19表达降低，提示不良环境所致子一代生殖细胞表观遗

传改变是引发隔代效应的可能机制。