高效液相色谱法 (2).ppt

*六、样品的分析第62页，共106页，星期日，2025年，2月5日1.HPLC的日常操作条件温度10～30℃;相对湿度≤80％；最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。11.8高效液相色谱仪的维护和保养2.进样器的保养????每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。第63页，共106页，星期日，2025年，2月5日*2.泵的保养流动相一般应该先脱气，避免泵内堵塞或有气泡防止固体微粒进入泵体防止溶剂瓶内的流动相被用完流动相不应含有腐蚀性物质不超过规定的最高压力进液处的沙芯过滤头要经常清洗第64页，共106页，星期日，2025年，2月5日4.柱的保养

（1）柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；

（2）当柱子和色谱仪联结时，阀件或管路一定要清洗干净；

（3）要注意流动相的脱气；

（4）避免使用高粘度溶剂作为流动相；??（5）进样样品要提纯；

（6）严格控制进样量；

（7）每天分析结束后，要清洗进样阀中残留的样品；

（8）每天分析结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；

（9）若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭；第65页，共106页，星期日，2025年，2月5日*色谱柱清洗与保存第66页，共106页，星期日，2025年，2月5日5.检测器(UV)的保养（1）紫外灯的保养：在分析前、柱平衡的差不多时，打开检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。

（2）样品池要保养。第67页，共106页，星期日，2025年，2月5日*6.其它部件维护与保养第68页，共106页，星期日，2025年，2月5日*第69页，共106页，星期日，2025年，2月5日*11.9高效液相色谱分析方法定性分析方法定量分析方法：外标法、内标法 同GC第70页，共106页，星期日，2025年，2月5日*1.外标法（一）定量分析方法第71页，共106页，星期日，2025年，2月5日*以待测组分和内标物的峰高比或峰面积比求算试样含量的方法。（1）内标校正曲线法：2.内标法第72页，共106页，星期日，2025年，2月5日*（2）内标对比法（3）校正因子法第73页，共106页，星期日，2025年，2月5日*(ms)样品—样品溶液中内标物的含量；(ms)对照—对照品溶液中内标物的含量；w—平均片重(或丸重)；m—取样量；(Ai/As)样品—样品溶液中，待测物A/内标物A；(Ai/As)对照—对照品溶液中，待测物A/内标物A。第74页，共106页，星期日，2025年，2月5日*例：用内标法测定复方乙酰水杨酸片(APC)中阿司匹林A、非那西汀P、咖啡因C三组分的质量分数，扑热息痛S作内标物。实验条件：流动相：甲醇/三乙醇胺=1/500，流量1mL/min；UV273nm检测。实验结果如下表。样品溶液：称取1片量的药品粉末0.5005g经多次萃取后配制成100mL溶液。wA、wP、wC为样品中三组分的未知质量(g/片)，0.5005g为加入内标物的质量。试用内标对比法求：⑴每片中A、P和C的含量；⑵每片中A、P和C的质量分数。定量分析方法实例第75页，共106页，星期日，2025年，2月5日*定量分析方法实例PASC图10-17APC的分析被测溶液所含组分阿司匹林A内标物S非那西汀P咖啡因C相对保留时间/min0.531.001.452.50对照溶液c0.2200.0350.1500.035A154856171222692272372221样品溶液cwA0.035wPwCA178024202694820968407792单位：c:g/100mL，A:μV·s第76页，共106页，星期日，2025年，2月5日*定量分析方法PASC图18-17APC的分析第77页，共106页，星期日，2025年，2月5日*定量分析方法PASC图10-17APC的分析⑵每片中A、P和C的质量分数ωi：第78页，共106页，星期日，2025年，2月5日*第十二章离子色谱法

Chapter12.ionhromatograph,IC第79页，共106页，星期日，2025年，2月5日*1．高压输液系统由于高效液相色谱所用固定相颗粒极细，因此对流动相