真核基因表达调控.pptVIP

0504020301HMLαMATaHMRaHMLαMATaHMRaHMLαMATαHMRa基因转换核酸内切酶HO酵母的交配型转换四、DNA的甲基化与基因调控：DNA的甲基化在真核生物中，5-甲基胞嘧啶主要出现在CpG序列、CpXpG、CCA/TGG和GATC中CpG二核苷酸通常成串出现在DNA上，CpG岛真核生物细胞内存在两种甲基化酶活性：日常型甲基转移酶从头合成型甲基转移酶DNA甲基化抑制基因转录的机理01DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，从而影响了蛋白质与DNA的相互作用，抑制了转录因子与启动区DNA的结合效率。5-甲基胞嘧啶在DNA上并不是随机分布的，基因的5和3端往往富含甲基化位点，而启动区DNA分子的甲基化密度与基因受抑制的程度密切相关。（见下图）02表8-1甲基化修饰对转录的影响CpG密度低（28/1.4kb）高（141/1.5kb）1/10低（26/3.3kb)HhaI低水平甲基化00+（HhaI）（24mCpG/1.5kb）SssI全部甲基化+（SssI）+（SssI）+（SssI）基因导入Hela细胞完全甲基化基因是否表达小鼠α-珠蛋白基因人α-珠蛋白基因人γ-珠蛋白基因启动区装上增强子序列表达表达(部分）不表达（完全）表达————甲基化还提高了该位点的突变频率：5-mC主要出现在5-CpG-3序列中，5-mC脱氨后生成T，不易被识别和校正。如：在脑瘤、乳腺癌和直肠癌细胞中，p53基因第273位密码子含CpG序列，常由CGT突变为CAT或TGT（Arg→His或Cys）。3.DNA甲基化与X染色体失活X染色体的失活中心：Xic，失活的染色体上绝大多数基因都处于关闭状态，DNA序列都高度甲基化。Xist：只在失活的染色体上表达，而不在活性的X染色体上表达，该基因产物是一功能性RNA分子。Xist甲基化与X染色体失活XistX染色体其他位点甲基化，不转录活性去甲基化，活性去甲基化，转录失活甲基化，失活位置效应（Positioneffect）：指基因转移到基因组上新位置而引起基因表达的改变常染色质（euchromatin）---基因可以转录活性基因置于异染色质内会失活异染色质（hetrochromatin）---基因不能转录,活性染色质由于核小体构型发生构象的改变，往往具有疏松的染色质结构从而便于转录调控因子与顺式调控元件结合和RNA聚合酶在转录模板上滑动。五、染色质结构与基因表达调控：（一）DNaseⅠ的敏感性和基因表达转录活跃区域对核酸酶的敏感度增加1、DNaseⅠ超敏感位点（hypersensitivesite）：具有转录活性的基因周围的DNA区域对DNaseⅠ降解高度敏感。2、特点：（1）一般在转录起始点附近，即5’启动子区域（2）低甲基化区（3）不存在核小体结构（4）裸露易与反式作用因子结合例：鸡成红细胞中-血红蛋白基因与输卵管中的卵清蛋白基因。两栖动物卵细胞减数分裂时的灯刷染色体第四节真核生物转录水平上的基因表达调控真核基因转录真核基因结构“基因”的分子生物学定义：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列。（二）真核基因转录的主要成分启动子转录模板RNA聚合酶IIRNA聚合酶II基础转录所需的蛋白因子（以“TFII”表示）定义：影响自身基因表达活性的非编码DNA序列。例：启动子、增强子、沉默子等启动子：