细胞骨架蛋白 (2).ppt

肌动蛋白微丝的聚合过程肌动蛋白纤维装配过程:成核、生长、动态平衡三个连续的过程。肌动蛋白单体有极性,装配呈头尾相接,故微丝(MF)有正极与负极。体外实验：MF正极与负极都能生长，正极生长快，负极慢；去装配时，负极比正极快。由于G-actin在正极端装配，负极去装配。在体内,有些微丝是永久性的结构,有些微丝是暂时性的结构。第31页，共76页，星期日，2025年，2月5日肌动蛋白丝的分支肌动蛋白可聚合成长纤维,同时形成分支结构。原子力显微镜(atomicforcemicroscope,AFM)图在生长、发育的信号调控中具有重要的调控作用.第32页，共76页，星期日，2025年，2月5日三、肌动蛋白相关蛋白肌动蛋白+肌动蛋白相关蛋白（actin-associatedproteins,AAP）性质发生改变.已分离到许多AAP，多数细胞含有10多种APP，AAP与肌动蛋白的互作是竞争性的。第33页，共76页，星期日，2025年，2月5日（一）钙结合蛋白许多肌动蛋白相关蛋白（AAP）与肌动蛋白结合受Ca2+控制,分子中有专一的Ca2+结合部位。如小白蛋白（parvalvumin）,是一种钙结合蛋白,分子中具有EF手结构,在钙浓度为10-6mol/L时能与钙结合(胞内外Ca2+浓度相差1万倍左右),许多钙结合蛋白都有类似结构。第34页，共76页，星期日，2025年，2月5日（二）控制聚合的蛋白质这类蛋白质能够通过加帽（capping）、单体结合（monomer-sequestering）和解聚(depolymerization)来控制肌动蛋白的聚合，有以下几类：第35页，共76页，星期日，2025年，2月5日1.加帽蛋白（cappingprotein）可选择性阻断F-肌动蛋白微丝的一端.如倒刺端加帽蛋白会造成微丝缩短，而尖端加帽蛋白会造成微丝的延长。这种作用使细胞骨架重排，对那些高运动性细胞特别重要。尖端加帽蛋白:β辅肌动蛋白（β-actinin）,Mr类似肌动蛋白。倒刺端加帽蛋白:简称HAI，Mr约20kD，可能是Mr为150kD-200kD蛋白质的水解产物。第36页，共76页，星期日，2025年，2月5日肌动蛋白丝两端生长用加帽蛋白封住负端,微丝继续快速加长,假如用加帽蛋白封住正端,F-肌动蛋白加长的速率非常慢，表明正端是生长端。第37页，共76页，星期日，2025年，2月5日2.F-肌动蛋白切割蛋白钙结合蛋白，但无EF手结构，故不属钙调蛋白类。常见有胶溶蛋白（gelsolin），该蛋白既具有倒刺端加帽蛋白活性，又具有钙激活的微丝切割活性。存在于细胞中，也可分泌入血（有一段分泌前导肽）。血中胶溶蛋白具有清除死亡细胞释放入血的F-肌动蛋白功能。第38页，共76页，星期日，2025年，2月5日肠绒毛蛋白（villin）：具Ca2+依赖性切割活性；片段化蛋白（fragmin）：参与肌动蛋白的切割调节；肌割蛋白（severin）：具加帽和切割活性；胶溶蛋白及相关切割蛋白也有肌动蛋白聚合的成核作用。当将其加入G-肌动蛋白溶液时，G-肌动蛋白的聚合反应加强。第39页，共76页，星期日，2025年，2月5日3．肌动蛋白单体结合蛋白能与G-肌动蛋白单体形成1:1复合物，阻止肌动蛋白聚合。如肌动蛋白抑制蛋白（profilin）是一种小分子碱性多肽（Mr12kD-15kD），首先从胸腺获得，血小板中含量最高；酵母中也发现一些大小和性质相似的蛋白质。体外实验发现，它能降低G-肌动蛋白单体聚合反应。敲除其基因的酵母不能成活(致死性)。第40页，共76页，星期日，2025年，2月5日4．F-肌动蛋白解聚蛋白小分子肌动蛋白，具有胶溶蛋白和肌动蛋白抑制蛋白的双重活性，能切割F-肌动蛋白并结合G-肌动蛋白单体，这些蛋白被称为肌动蛋白解聚因子。如人类大脑分离的cofilin（磷蛋白，去磷酸化后易位到细胞核，Cofilin在细胞的运动中具有广泛而重要的作用），肾脏分离的destrin，从星鱼卵细胞分离的肌动蛋白蚕食蛋白（depactin）和从星鱼分离的载肌动蛋白（actophorin）均属于这一类。第41页，共76页，星期日，2025年，2月5日（三）产生力的蛋白质（分子马达）主要为肌球蛋白类，可组成粗丝，具ATP酶活。肌球蛋白超家族分18类，分为传统肌球蛋白和非传统肌球蛋白，只有肌球蛋白Ⅱ为传统肌球蛋白，其余为非传统肌球蛋白。这类蛋白在肌肉中含量