3D打印PLA_PTMC-Ca₃(PO₄)₂复合支架的制备及其对骨缺损修复的应用研究.pdf

中文摘要

3D打印PLA/PTMC-Ca₃(PO₄)₂复合支架的制备及其对骨缺

损修复的应用研究

研究背景:

骨是人体最坚硬的组织，它为身体提供框架，与肌肉系统协同工作，使得身

体能够进行各种运动和动作，并且还支持和保护内部器官，参与造血和钙磷代谢

的调节，具有强大的自我修复和再生能力。尽管如此，在创伤或骨肿瘤引起的缺

损面积较大时，缺损部位将无法完成自我修复，骨缺损依然是骨科医生长久以来

面临的棘手问题。研究者们对骨缺损的治疗方法进行了各种各样的探索，但现行

的治疗方法各有弊端：自体骨移植能提供的骨量有限，且会产生二次创伤；同种

异体骨移植可能引起疾病传播和排异反应；异种异体骨移植的排异概率则更为明

显；不同材质的人工骨在孔隙结构、机械强度、降解性能、生物相容性及成骨性

能等方面各有限制，优化空间依然存在。

近年来3D打印技术发展迅速，采用3D打印技术制造骨缺损支架，我们能

够较好地调节内部孔隙结构，解决了部分材料孔隙结构不足的问题，为骨细胞的

长入和新生血管形成提供了充足的空间。

聚乳酸（polylacticacid,PLA）是以有机酸乳酸为单体，通过酯键连接的新

型聚酯材料，其可以在自然环境中被完全分解为二氧化碳和水，并且力学性能良

好，能提供较为强韧的支撑。聚三亚甲基碳酸酯（polytrimethylenecarbonate,

PTMC）是一种质地柔韧的、生物相容性良好的聚合物，已被证明可以在体内通

过表面侵蚀降解，降解过程中不会形成酸性化合物，从而可以避免材料周围pH

值过低导致自动加速降解。磷酸钙[Ca₃(PO₄)₂]本身是骨骼的重要组成物质，且本

身在降解过程中能释放出钙离子和磷酸根离子，能够促进骨髓间充质干细胞的分

化、诱导新骨的形成。在本研究中，我们意图发挥三种材料各自的优势，将聚乳

酸、聚三亚甲基碳酸酯、磷酸钙三种物质混合，研制了PLA/PTMC-Ca₃(PO₄)₂复

合支架材料，通过3D打印技术制造出了多孔隙支架，并通过红外光谱检测、水

接触角检测、体外降解实验和万能拉力机测试验证了其组成成分、亲水性、降解

性能和力学性能。通过细胞实验系统地检测了包括细胞毒性、成骨诱导活性等性

能；通过制造新西兰兔股骨外侧髁骨缺损模型，将支架植入其中进行Micro-CT、

II

HE染色、Masson染色等进一步验证了其在体内的骨缺损修复效果。

目的：

本研究意图结合多种材料的优势，以PLA和PTMC为基础材料，以是否负

载β-Ca₃(PO₄)₂颗粒为变量，采用3D打印技术制备一种性能良好的多孔隙支架。

评价其降解性能、力学性能和亲水性等指标的同时开展体内、体外实验检测其相

关生物学性能，为探究3D打印PLA/PTMC-Ca₃(PO₄)₂复合多孔支架的理化性质、

生物学特性、体内研究和临床用应提供理论支持，最终推动骨缺损修复的进展。

方法：

1.将材料溶解混合后，以是否负载β-磷酸三钙[β-Ca₃(PO₄)₂]微粒为变量，使

用挤丝机分别生产PLA/PTMC和PLA/PTMC-Ca₃(PO₄)₂线材，使用熔融沉积型3D

打印机分别制作合适规格的PLA/PTMC和PLA/PTMC-Ca₃(PO₄)₂多孔支架。

2.将一定数量的PLA/PTMC和PLA/PTMC-Ca₃(PO₄)₂支架分别浸于PBS和

脂肪酶溶液中，置于37.5℃的空气振动浴中每日震动，定期称重检测其降解性

能；通过傅立叶红外光谱仪、电子万能试验机、标准型角接触测量仪对其进行性

能的表征。

3.在体外实验中，将支架与兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）混合培养，采

用细胞活死染色和CCK-8实验检测复合支架对BMSCs的细胞毒性和生物相容性；

采用茜素红染色、碱性磷酸酶定量检测和qPCR实验检测复合支架对BMSCs的

毒性和成骨诱导活性。

4.在体内实验中，制造远大于自我修复临界点的直径8mm的新西兰兔股骨

外侧髁骨缺损模型，分别将PLA/PTMC和PLA/PTMC-Ca₃(PO₄)₂支架置入其中，

在4,8,12周时取股骨标本，采用Micro-CT，HE染色，Masson染色等方法在骨

缺损修复模型中检测复合支架对于骨缺损修复的促进作用。

结果：

1.使用3D打印技术成功制备了含有PLA、PTMC、β-Ca₃(PO₄)₂三种物质的

复合多孔支架。

2.在降解实验中，截止第14