3.2基因工程的基本操作程序（分层练习）（解析版）.docx

3.2基因工程的基本操作程序

一、单项选择题：

1．某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，下列有关PCR扩增过程相关叙述不正确的是()

A．为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的限制性核酸内切酶位点

B．设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对，而造成引物自连

C．PCR扩增时，复性温度的设定与引物长度、碱基组成无关

D．如果PCR反应得不到任何扩增产物，则需要降低退火温度或重新设计引物

【答案】C

【详解】

为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的限制性核酸内切酶位点，A正确；

设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对，而造成引物自连，B正确；

复性温度与时间取决于引物的长度、碱基组成及其浓度，还有靶基序列的长度，如果引物中G、C含量高，需要设定更高的复性温度，C错误；

如果PCR反应得不到任何扩增产物，可能是引物不合适，则需要降低复性温度或重新设计引物，D正确。

2．基因表达载体的构建是基因工程的核心。下列关于干扰素基因表达载体的叙述，正确的是()

A．干扰素基因可通过从造血干细胞中获取mRNA并反转录获得

B．复制原点可使干扰素基因在受体细胞中存在，并遗传给下一代

C．启始密码子和终止子在干扰素基因的转录中均发挥着重要作用

D．抗生素抗性基因的存在有助于干扰素基因在受体细胞中的表达

【答案】B

【详解】

干扰素基因在造血干细胞中不表达，因此干扰素基因不可通过从造血干细胞中获取mRNA并反转录获得，A错误；

复制原点可使干扰素基因在受体细胞中存在，并遗传给下一代，B正确；

启动子和终止子在干扰素基因的转录中均发挥着重要作用，起始密码子在遗传信息的翻译过程中起作用，C错误；

抗生素抗性基因的存在有助于筛选出含有目的基因的受体细胞，但不能促进干扰素基因在受体细胞中的表达，D错误。

3．下列关于目的基因的检测与鉴定的叙述，错误的是()

A．目的基因在真核细胞中能否稳定遗传的关键是目的基因是否插入质粒DNA中

B．检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法

C．目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的

D．如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子

【答案】A

【详解】

A.目的基因检测的第一步是检测目的基因是否插入到转基因生物的染色体DNA上，A错误；

B.通过抗原－抗体杂交检测目的基因是否翻译成了蛋白质，检测受体细胞是否含有目的基因及其是否成功转录的方法都是分子杂交法，B正确；

C.目的基因的鉴定通常是在个体水平上进行的，如抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等，C正确；

D.如在受体细胞内检测到目的基因表达的蛋白质，可确定目的基因首端含有启动子，D正确。

4．在基因表达载体的构建中，下列说法正确的是()

①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止④所有基因表达载体的构建是完全相同的⑤必须在细胞外进行

A．一个 B．两个

C．三个 D．四个

【答案】C

【详解】一个基因表达载体的组成应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等，①错误；有了启动子才能驱动基因转录出mRNA，②正确；终止子的作用是使转录在所需要的地方停止，③正确；所有基因表达载体的构建不是完全相同的，④错误；基因表达载体的构建必须在细胞外进行，⑤正确。

5．科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中，不合理的是()

A．构建表达载体除了目的基因，还需要启动子、终止子、复制原点、标记基因

B．用含有四环素的培养基可以筛选出已经导入含标记基因的大肠杆菌

C．小鼠的β-珠蛋白基因可以直接转给大肠杆菌进行表达得到β-珠蛋白

D．用Ca2＋处理大肠杆菌后，表达载体易于导入大肠杆菌中

【答案】C

【详解】

A.构建表达载体除了目的基因，还需要启动子、终止子、复制原点、标记基因等，A正确；

B.抗四环素基因为标记基因，因此用含有四环素的培养基可以筛选出已经导入含标记基因的大肠杆菌，B正确；

C.将目的基因导入受体细胞前需要构建基因表达载体，否则目的基因不能在受体细胞中稳定存在和表达，C错误；

D.用Ca2＋处理大肠杆菌后，大肠杆菌处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，因此表达载体易于导入大肠杆菌中，D正确。

6．基因工程、细胞工程都可以克服远缘杂交不亲和的障碍，在农作物新品选育等方面具有广阔的前景和较高的应用价值。下列叙述错误的是（）

A．实验室中将目的基因导入植物细胞采用最多、最有效的方法是显微注射法

B．农杆菌转化法的原理是Ti质粒中的T-D