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第3章基因工程
(考试时间:75分钟总分:100分)
单选题(每题3分,共60分)
1.某细菌DNA分子上有4个Sau3AⅠ的酶切位点,经Sau3AⅠ处理后会形成4个大小不同的DNA片段。若是用BamHⅠ处理,则只会形成2个大小不同的DNA片段。Sau3AⅠ和BamHⅠ的识别序列及切割位点如表所示。下列叙述不正确的是(????)
限制酶名称
识别序列及切割位点
BamHⅠ
G↓GATCC
Sau3AⅠ
↓GATC
A.上述两种限制酶切割后可形成相同的黏性末端
B.该DNA分子上有两个BamHⅠ的酶切位点
C.黏性末端能通过T4DNA连接酶连接
D.若用两种酶共同处理,会形成6个大小不同的DNA片段
【答案】D
【详解】
A.BamHI和Sau3AI两种限制酶切割后形成的黏性末端均为GATC,A正确;
B.该DNA分子上有4个Sau3AI的酶切位点,经Sau3AI处理后形成4个DNA片段,可知该DNA分子为环状DNA,用BamHI处理后,得到2个DNA片段,说明该DNA分子上有两个BamHI的酶切位点,B正确;
C.T4DNA连接酶能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,此外还可以连接平末端,但连接平末端时的效率比较低,C正确;
D.该DNA分子上有4个Sau3AI的酶切位点,有2个BamHI的酶切位点,但是BamHI识别序列中包含Sau3AI的识别序列,所以同时用两种酶共同处理,不会形成6个大小不同的DNA片段,D错误。
2.下列有关“DNA粗提取与鉴定”、“PCR扩增”、“琼脂糖凝胶电泳”实验的叙述中,正确的是(????)
A.DNA的粗提取与鉴定实验中可利用DNA在酒精中溶解度较大的特点来提取DNA
B.将提取到的丝状物与二苯胺溶液充分混匀后,溶液即可变为蓝色
C.PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶,该酶在延伸过程中起作用
D.凝胶载样缓冲液中加入的核酸染料能与DNA分子结合,便于在紫外灯下观察
【答案】C
【详解】
A.DNA的粗提取与鉴定实验中利用DNA不溶于酒精、但某些蛋白质溶于酒精的原理,可以初步分离DNA与蛋白质,A错误;
B.将丝状物溶于2mol/L的5mL的NaCl溶液中,然后向试管中加入4mL的二苯胺试剂,沸水浴加热5min,试管冷却后溶液呈现蓝色,B错误;
C.PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶,该酶在延伸过程中根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,C正确;
D.用电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA分子结合,可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来,D错误。
3.退化性起源学说将病毒的起源归纳为两个阶段。首先寄生物在细胞内产生可独立复制的DNA质粒,其次编码寄生物亚细胞结构单位的基因发生突变,形成编码病毒外壳蛋白的相关基因。随着进化的进行,新获得的可在细胞间转移的特性被进一步选择下来。下列有关说法错误的是(????)
A.寄生物产生的可独立复制的DNA质粒上具有复制原点
B.编码病毒蛋白外壳的相关基因可能位于DNA质粒上
C.通过自然选择保留下的病毒对宿主细胞是有利的
D.可转移特性使病毒具有侵染宿主细胞的能力
【答案】C
【详解】
A.寄生物产生的可独立复制的DNA质粒上具有复制原点,A正确;
B.根据题意“首先寄生物在细胞内产生可独立复制的DNA质粒,其次编码寄生物亚细胞结构单位的基因发生突变,形成编码病毒外壳蛋白的相关基因”可知,编码病毒蛋白外壳的相关基因可能位于DNA质粒上,B正确;
C.通过自然选择保留下的病毒依赖宿主细胞生活,对宿主细胞有害,C错误;
D.病毒可在细胞间转移使病毒具有侵染宿主细胞的能力,D正确。
4.下列关于基因工程基本工具的叙述,正确的是(????)
A.限制酶能特异性地识别6个核苷酸序列
B.限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键,产生2个游离的磷酸基团
C.有些DNA连接酶既能连接双链DNA片段互补的黏性末端,又能连接双链DNA片段的平末端,从而恢复被限制酶切开的氢键
D.用做分子运输车的质粒常有特殊的抗生素合成基因,便于重组DNA分子的筛选
【答案】B
【详解】
A.大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成,少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成,A错误;
B.限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开,即一条链断1个磷酸二酯键,产生1个游离的磷酸基团,所以限制酶切割DNA分子一次可断开2个磷酸二酯键,产生2个游离的磷酸基团,B正确;
C.T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端,又可以“缝合”双链DNA片段的平末端,恢复被限制酶切开的磷酸二酯键,而不是氢键,C错误;
D.作为载体的质粒通常采用抗性基因(四环素抗
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