第四单元 植物细胞工程（教师版）.docx

细胞工程

第一节细胞工程

一、植物细胞工程的基本技术

1.细胞工程概念：细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法，通过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性生物工程。(P31)

①原理方法：细胞生物学、分子生物学和发育生物学；

②操作水平：细胞器、细胞或组织水平；

③目的：得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品；

④分类：植物细胞工程、动物细胞工程。

（一）植物细胞的全能性

1．概念：细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。(P34)

2.是否表现出全能性的两种判断标准：

（1）细胞经分裂和分化后是否产生完整生物体。

（2）细胞是否能分化成其他各种细胞。

3.判断以下例子是否表现出了细胞的全能性

(1)利用菊花茎段培养获得试管苗是。

(2)芽原基的细胞发育为芽，叶原基的细胞发育为叶否。

(3)受精卵发育成个体是。

(4)蜜蜂的孤雌生殖中，卵细胞直接发育成雄蜂是。

(5)造血干细胞可分化形成多种血细胞否。

(6)通过花药离体培养，获得单倍体幼苗是。

(7)胚胎干细胞可分化发育成为各种组织器官的细胞是。

(8)种子发育成完整植株否。

4.细胞具有全能性的原因（物质基础）：一般来说，生物体的细胞中都含有该物种的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所需的全部遗传信息。

5.生物体生长发育过程中细胞不表现全能性的原因（不离体的细胞无法表现出全能性的原因）：在特定的时间和空间条件下，细胞中的基因会选择性地表达（从而形成生物体的不同组织和器官）。(P34)

6.是不是所有的活细胞都具有全能性？

不是，例如哺乳动物成熟的红细胞、植物成熟的筛管细胞。

7.细胞具有的全能性一定能表现出来吗？

不是，例如动物的体细胞。

8.比较一般情况下下列细胞全能性的大小

(1)受精卵＞生殖细胞＞体细胞

(2)分化程度低的细胞＞分化程度高的细胞、

(3)分裂能力强的细胞＞分裂能力弱的细胞

(4)植物细胞＞动物细胞

(5)幼嫩的细胞＞衰老的细胞

（二）植物组织培养技术

1．植物组织培养概念：将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。(P35)

2.离体培养的植物器官、组织或细胞被称为外植体。(P35)

3.植物组织培养的原理：植物细胞的全能性。

植物组织培养的生殖方式：无性生殖。

植物组织培养的分裂方式：有丝分裂。

菊花植物组织培养

1.菊花植物组织培养的原理

(1)植物细胞一般具有全能性；(P35)

(2)脱分化：在一定的激素和营养等条件的诱导下，让已经分化的细胞经过诱导后，失去其特有的结构和功能，转变成未分化细胞的过程。结果：形成愈伤组织。

*愈伤组织的特点：不定形的薄壁组织团块。(P35)一般不需要光照。此过程中涉及的生命活动只有细胞增殖（有丝分裂），没有细胞分化。

(3)再分化：脱分化产生的愈伤组织，在一定的培养条件下，再分化出芽、根等器官，进而形成完整的小植株。(P35)需要给予适当时间和强度的光照，诱导叶绿素的合成，使试管苗能够进行光合作用。此过程中涉及的生命活动既有细胞增殖（有丝分裂），又有细胞分化。再分化实质：基因的选择性表达。

(4)激素的作用：植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。

它们的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向；

生长素用量与细胞分裂素用来的比值

结果

比值高

有利于根的分化，抑制芽的形成

比值低

有利于芽的分化，抑制根的形成

比值适中

促进愈伤组织的形成

2.选材：经常选择根尖（分生区）、茎的韧皮部（形成层）等。

原因：分裂能力强、分化程度低，容易诱导形成愈伤组织。

3.若培养物取自植物的幼茎、叶片等含有叶绿体的部位，愈伤组织中是否会含有叶绿体？为什么？

愈伤组织中不含有叶绿体；培养物经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞，因此，愈伤组织中不含有叶绿体。

4.植物组织培养中细胞表现出全能性的条件

(1)离体（最关键）。(2)严格的无菌条件。(3)适宜的培养条件。

(4)适宜浓度和比例的激素。(5)一定的营养条件。

5.为什么一定要离体才能表现出全能性？

若细胞不离体，细胞中的基因会选择性地表达，从而形成生物体的不同组织和器官，不能表现出全能性。

6.如何控制严格的无菌条件？

(1)用体积分数为70%的酒精对手、超净工作台、外植体进行消毒,对外植体处理还需要质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液,清洗外植体需要使用无菌水。

(2)对培养基和器械进行灭菌；

(3)接种操作必须在酒精灯火焰旁进行。

7.适宜的培养条件包括那些？

①温度（例如菊花植物组织培养应为18-22℃）。

②光照（