第十单元 蛋白质工程的原理和应用（教师版）.docx

第三章基因工程

第四节蛋白质工程的原理和应用

一、蛋白质工程

1.对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的。（P93）

2.蛋白质工程的概念：蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过改造或合成基因，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。（P93）

(1)基础：蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。

(2)手段：通过基因改造或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。

(3)操作对象：基因。

(4)目的：对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。

(5)地位：在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程。（P93）

(6)理论和技术条件：分子生物学、晶体学以及计算机技术的迅猛发展。（P93）

二、蛋白质工程崛起的缘由

1．基因工程的实质：将一种生物的基因转移到另一种生物体内，后者可以产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状。（P93）

2．基因工程的不足：基因工程在原则上只能产生自然界中已存在的蛋白质。（P93）

3．天然蛋白质的不足：天然蛋白质是生物长期进化过程中形成的，天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要，却不一定完全符合人类生产和生活的需要。（P93）

4．实例：玉米中赖氨酸的含量比较低，赖氨酸合成中两种酶的氨基酸被替换，就可以使玉米叶片和种子中游离赖氨酸分别提高5倍和2倍。（P93）

三、蛋白质工程的基本原理

1．蛋白质工程的目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行设计改造。（P94）

2．蛋白质工程的实质：改造基因或合成基因（来定向改造现有蛋白质或制造新的蛋白质）。（P94）

3．天然蛋白质合成过程：天然蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的。（P94）

4.蛋白质工程思路（蛋白质工程与天然蛋白质合成的过程相反）：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新基因→获得所需要的蛋白质（包括目的基因转录成，然后翻译获得氨基酸序列（多肽链），再通过盘曲折叠获得高级结构进而行使预期功能）。（P94）

5.确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因？（P94）

确定目的基因的碱基序列后，可以人工合成目的基因，或应用基因定点突变技术来进行碱基的替换、增添等进而改造基因。

蛋白质工程的应用

1．在医药工业方面的应用

(1)研发速效胰岛素类似物：科学家通过改造胰岛素基因使B链28位脯氨酸替换为天冬氨酸或者将它与29位的赖氨酸交换位置，从而有效抑制了胰岛素的聚合，研发出速效胰岛素类似物。（P95）

(2)提高干扰素的保存期：将干扰素分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，提高了干扰素的保存时间。（P95）

(3)改造抗体：通过改造基因，将小鼠抗体上结合抗原的区域（即可变区）“嫁接”到人的抗体（即恒定区）上，经过这样改造的抗体诱发免疫反应的强度就会降低很多。降低人对小鼠单抗了抗体的免疫反应。（P95）

2．在其他工业和农业方面的应用

(1)改进酶的性能或开发新的工业用酶：利用蛋白质工程获得蛋白酶的多种突变体。（P95）

(2)改造某些重要的酶：利用蛋白质工程改造参与调控光合作用的酶，以提高植物光合作用的效率。（P95）

3.蛋白质工程是一项难度很大的工程主要原因：蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往十分复杂。

4.蛋白质工程与基因工程比较

项目

蛋白质工程

基因工程

操作对象

基因

基因

操作起点

预期蛋白质功能

目的基因

操作水平

DNA分子水平

DNA分子水平

操作流程

预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到并改变对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新基因→获得所需要的蛋白质

目的基因的筛选与获取→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定

结果

可生产自然界没有的蛋白质

可生产自然界已有的蛋白质

实质

通过改造或合成基因来定向改造现有蛋白质或制造新的蛋白质

将一种生物的基因转移到另一种生物体内，后者可以产生它本不能产生的蛋白质，进而表现出新的性状（基因重组）

联系

①蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程；

②蛋白质工程离不开基因工程，其包含基因工程基本操作；

5.判断是基因工程还是蛋白质工程的依据：是否改造或合成基因，得到的蛋白质是否为天然蛋白质。

6.为什么蛋白质工程改造基因而不是直接改造蛋白质？

（1）蛋白质的高级结构十分复杂，直接改造难度大。

（2）蛋白质是由基因编码的，改造了基因可以间接改造蛋白质。

（3）基因可以遗传，蛋白质无法遗传。

补充：基因的定点突变技术1——重叠PCR

（1）该过程需要4种引物；

（2）PCR1的产物AB是引物a和引物b扩增