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第三章基因工程
第二节基因工程的基本操作程序
1.基因工程的基本操作程序:
(1)_________________________;(2)_________________________(核心);
(3)_________________________;(4)_________________________。(P76)
一、目的基因的筛选与获取
1.目的基因的概念:在基因工程的设计和操作中,用于改变_______________或获得_______________等的基因。(P76)
2.根据不同的需要,目的基因是不同的,主要是指_______________。(P76)
3.常见目的基因类型:_______________、__________、__________、__________和__________等相关的基因。实例:培养转基因抗虫棉用到的目的基因是_____
__________。(P76)
4.筛选合适的目的基因较为有效的方法:从相关的__________和__________的基因中进行筛选。实例:在培育转基因抗虫棉之前,科学家不仅掌握了Bt基因的__________,也对Bt基因的表达产物——_______________有了较为深入的了解。(P76)
5.认识基因结构和功能的技术方法:__________技术、__________数据库(GenBank)、__________工具(如BLAST)等的应用,越来越多的基因的结构和功能为人们所知,为找到合适的目的基因提供了更多的机会和可能。(P77)
6.Bt抗虫蛋白的抗虫原理是什么?(P77相关信息)
_____________________________________________________________________
__________________________________________________。
7.为什么Bt抗虫蛋白不会对人畜产生危害?(P77相关信息)
_____________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________________________________________________。
8.获取目的基因的方法:__________、_______________、_______________。(P82)
9.PCR的概念:PCR是_______________的缩写,它是一项根据_______________的原理,在体外提供__________的各种组分与反应条件,对__________________
______________________________进行大量复制的技术。(P77)
(1)全称:____________________。
(2)原理:____________________。
(3)操作环境:______________________________。
(4)目的:________________________________________。
(5)优点:_____________________________________________。
10.PCR由__________等人于1985年发明,并于1993年获得诺贝尔化学奖。(P77)
11.条件:DNA模板、分别与两条模板链结合的2种_____、四种_______________、______________________________。(P77)
12.PCR的过程:目的基因DNA受热变性后解为_____,_____与单链相应_____
结合;然后以单链DNA为模板在(耐高温的)__________作用下进行延伸,即将4种脱氧核苷酸加到_______________,如此重复循环多次。每次循环一般可以分为_____、_____、_____三步。(P77)
(1)变性:温度上升到90℃以上,目的基因DNA____________________。该过程中打开的是哪种化学键是__________。(P78)
(2)复性:温度下降到50℃左右时,__________通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。该过程碱基互补配对的一定是引物与模板链吗?__________________
___________________________________。(P78)
(3)延伸:温度上升到72℃左右时,溶液中_________
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