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需氧革兰阳性杆菌及检验.pptVIP

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(二)培养特性厌氧或微需氧菌。初次分离需在厌氧环境中培养,传代后在有氧条件下也能生长。(三)生化反应*氧化酶(–),触酶(–),发酵葡萄糖、乳糖,产酸不产气。红斑丹毒牡菌为红斑丹毒丝菌病的病原体。01主要发生在鱼类、家畜、家禽和兔类,人类也感染发病。02人接触动物或其产品经皮肤损伤而引起类丹毒。以局部感染为主,继而发展成淋巴管炎,可转变成关节炎。也可引起急性败血症或心内膜炎。03二.致病性三.微生物学检验*logo标本采集检验程序检验方法直接镜检2.分离培养生化反应4.动物试验第五节阴道加特纳菌形态与染色培养特性生化反应抵抗力一.生物学特性(一)形态与染色本菌革兰染色视菌株和菌龄不同而异。本菌具有多形性,两端钝圆,无鞭毛,无荚膜,无芽胞。(二)培养特性*兼性厌氧菌,营养要求较高,在一般营养琼脂平板上不生长。在含5%人血琼脂平板上置5%CO2,35~37℃培养24h后,形成针尖大小菌落;经48h后形成β溶血、圆形、光滑不透明的菌落。(三)生化反应*氧化酶(–),触酶(–),尿素酶(–)。发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖等,产酸不产气。(四)抵抗力所有菌株对氨苄青霉素、羧苄青霉素、苯唑青霉素、青霉素、万古霉素和甲硝唑敏感;对萘啶酸、新霉素、粘菌素和磺胺嘧啶耐药。标本采集病人血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等。死亡病畜标本:死于败血症的动物,严禁宰杀、解剖,可在消毒皮肤后割取耳朵、舌尖、采集少量血液。污染物品:皮革、兽毛、土壤等。标本处理:无杂菌污染标本直接接种,有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种。标本采集已处理标本直接涂片增菌培养分离培养Ascoli试验革兰染色荚膜染色初步报告血平板戊烷脒琼脂平板可疑菌落菌落涂片染色镜检鉴定试验肉汤培养动物实验动物死亡分离培养●噬菌体裂解●串珠试验●青霉素抑制试验涂片染色镜检革兰染色:涂片后升汞固定,革兰染色发现革兰阳性粗大杆菌、有荚膜,呈竹节样排列可初步报告。分离培养:一般接种血平板,37℃培养24h后观察菌落特点。污染的标本先加热处理再接种。动物试验:注射部位胶样水肿,肝脾肿大,出血等。在芽胞杆菌属中,除蜡样芽胞杆菌毒素对动物有致病作用外,炭疽芽胞杆菌是唯一具有致病力者。检验方法鉴定试验青霉素抑制试验炭疽芽胞杆菌在含5IU/ml的青霉素培养基上能生长,而在含10、100IU/ml的青霉素培养基上受到抑制不生长。1串珠试验与类炭疽芽胞杆菌鉴别2炭疽芽胞杆菌受低浓度青霉素作用后,在形态上发生明显的变化。如将本菌幼稚培养物接种于含0.05~0.5U/ml青霉素的培养基上,37℃6h,菌体肿大呈圆珠状,称串珠反应。3此反应可能与青霉素抑制细菌胞壁的合成作用有关,为炭疽杆菌所特有,可用于与其他类炭疽芽胞杆菌的鉴别。鉴定试验青霉素和串珠联合试验1噬菌体裂解试验与类炭疽芽胞杆菌鉴别2NaHCO3毒力试验有毒力的炭疽杆菌形成荚膜,菌落呈粘液型,无毒力的炭疽杆菌不形成荚膜,菌落呈粗糙型。3鉴定试验鉴定试验*根据炭疽芽胞杆菌菌体多糖是植物凝集素受体的原理。植物凝集素试验用已知的抗炭疽杆菌抗体测定标本中未知的抗原。炭疽杆菌沉淀原具有耐高热特征,在尸体组织和皮毛中数年仍能检出,故可作追溯性诊断。Ascoli热沉淀试验炭疽芽胞杆菌与其它需氧芽胞杆菌的鉴别鉴别项目炭疽芽胞杆菌枯草芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌及其它需氧芽胞杆菌形态菌体两端平整或凹陷两端钝圆两端钝圆荚膜+--动力-++菌落有小突起,边缘呈卷发状,粘稠菌落锯齿状粗糙菌落蜡样或粗糙不粘稠菌落肉汤絮状沉淀,上层清晰均匀混浊有菌膜均匀混浊有菌膜Ascoli+--溶血不溶血或微溶血++串珠试验+--二.蜡样芽胞杆菌形态与染色01培养特性02菌落特征03生化反应04抵抗力05(一)生物学特性形态与染色革兰阳性大杆菌,两端较钝、链杆状,长短不一,有鞭毛,无荚膜,可形成芽胞。培养特性*需氧或兼性厌氧,营养要求不高。普通琼脂平板:可形成圆形、隆起、灰白色、不透明、R型蜡滴样大菌落。血琼脂平板:菌落呈浅灰色,似毛玻璃状,菌落周围有α或β溶血。12乳光反应或卵黄反应:01在卵黄琼脂平板上生长迅速,培养3h后,虽看不到菌落,但该菌可分解卵磷脂而形成白色的混浊环,即为乳光反应或卵黄反应。02分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖,产酸不产气,不分解乳糖。01

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