医学课件-十 临床常见病原体检测.pptx

课程知识结构;;Case1;Tetracyclineforthetreatmentofscrubtyphus(rickettsiosis).

Thenheallayedafever.Afteraweek,thepatientwasdischargedfromhospital.;临床病原体检查目的;临床常见病原体检测

;;01;项目建设时间进程;感染性疾病的现状;AyoungBangladeshigirlinfectedwithsmallpox(1973);感染性疾病的现状;13;14;Coronavirusdisease2019(COVID-19)hasresultedinconsiderablemorbidityand?mortality?worldwide?sinceDecember2019.?;感染性疾病的现状;;感染性疾病的现状;02;正确收集标本应遵循的原则

—SPECIMENCOLLECTIONISTHEMOSTIMPORTANTSTEP!

;无菌versus有菌;（2）When

;（3）How;无菌技术（容器/手法）

足够的量

适当的建议

完整的申请单

;(4)StandardPrecautions;一、常见标本的采集（血液）

;一、常见标本的采集(尿液)

;一、常见标本的采集(粪便);一、常见标本的采集(呼吸道标本）;一、常见标本的采集(脑脊液等无菌体液）;一、常见标本的采集

（伤口、烧伤创面、脓肿及其他）;二、检查方法;2.病原体特异性抗原检测免疫荧光技术、酶免疫技术、化学发光技术、胶乳凝集技术等。

3.病原体核酸检测PCR、分子杂交、DNA测序等。

;4.分离、培养、鉴定金标准较费时,同时可进行药物敏感试验。

5.血清学检查如肥达氏试验、军团菌抗体检查等。应进行双份血清检测，两次抗体效价相差4倍以上有意义。但不能进行早期检测。

6.细菌毒素

7.质谱MALDI-TOFMS，目前主要对分离出来的纯菌落进行鉴定，一般不能对样本直接进行检测。

;03;The“RedQueenHypothesis”;耐药机制

(1)产生灭活酶或纯化酶

(2)改变抗生素作用部位的结构

(3)改变外膜蛋白的通透性,药物渗入细菌减少

(4)代谢拮抗物的产生或代谢旁路的产生

(5)细菌抗生素结合蛋白的改变

(6)细菌的外排系统

(7)生物膜的形成

;（1）手工试验1.纸片扩散法（S，I，R）

2.稀释法（MIC）

3.Etest（MIC）

（2）自动仪器Vitek，Microscan，Phoenix

（3）分子试验PCR直接检测mecA基因

（4）酶试验Nitrocefin、ESBL检测;K-B法;;

对所有?内酰胺类及??酶抑制剂的复合剂耐药并对氨基糖甙类、大环内脂类、克林霉素和四环素等抗生素多重耐药。治疗首选药物为万古霉素。

;1.CTX/CA比CTX抑菌圈或CAZ/CA比CAX5mm即为阳性

2.若ESBLs阳性,对青霉素类、所有头孢菌素类及单环类抗菌素耐药

3.主要在大肠埃希菌和克雷伯菌属等肠杆菌科细菌中产生

;04;传统的诊断方法

传统的疾病诊断方法大多为表型诊断，以患者的临床表现和病原体的表型检测为依据。

;

;病毒

可以用电子显微镜快速诊断，但是必须要有高量的病毒颗粒存在，而且方法也不方便

病毒培养，但很慢而且常培养不出来（需试出适合病毒生长的细胞株）

免疫学

分子生物学

;病实

毒验

感室

染诊

性断

疾

病

的;病毒感染的潜伏期(窗口期)血清中并无抗体的存在，无法以免疫学的方法来检测

PCR检测病毒量的变化上，比传统的方法更快速，有更高的特异性及灵敏度

;HBV基因分型;HBV分子检验诊断方法;HBVDNAFQ-PCR（real-timePCR）;HBV耐药检测（YMDD突变检测方法）;YMDD突变检测方法;HBV的分子生物学检验诊断的临床应用;分子生物学检验诊断技术在很大程度上

改变了感染性疾病的诊断方法;新技术：宏基因组学（metagenome）;05;60;Mosocomialinfection/hospitalinfection;;;