当归通过调控ASM_Cer_NLRP3通路发挥抗抑郁作用的机制研究.pdf

中文摘要

选题依据：

抑郁症是一种以持续的心情低落和兴趣减退为主要特征的常见精神障碍性疾病，

给个体、家庭及社会带来了沉重的负担。据世界卫生组织2023年报道，全球抑郁症

患者超过3.5亿人，约5%的成年人患有抑郁症。抑郁症病因复杂多样，发病机制尚

未完全阐明，大量研究表明鞘脂代谢参与了抑郁症的发生发展，目前已经成为治疗

抑郁症的潜在靶点。

当归为临床治疗抑郁症的常用中药，在经典抗抑郁复方中占有重要地位。国内

外研究表明，当归及其活性成分在治疗抑郁症中具有明确的疗效。课题组前期对当

归的抗抑郁作用及机制开展了大量研究，发现当归的抗抑郁机制与调节外周的鞘脂

代谢途径关键环节ASM/Cer密切相关，然而，其对中枢神经系统鞘脂代谢的调节作

用尚不明确。进一步研究结果表明当归可能通过调节ASM/Cer介导的炎症反应发挥

抗抑郁作用。经文献调研发现，NLRP3炎症小体通路是ASM/Cer的下游通路，Cer

的过度积累能引起NLRP3炎症小体通路的激活，与抑郁症的发生发展密切相关。基

于此，提出本课题的科学问题：当归是否可以通过调节中枢神经系统的ASM/Cer通

路，抑制下游NLRP3炎症小体通路激活，从而影响神经炎症发挥抗抑郁作用？

目的:

1.明确当归对CUMS抑郁模型大鼠中枢系统ASM/Cer通路及神经炎症的调节

作用。

2.阐明当归通过调节ASM/Cer通路，抑制NLRP3炎症小体通路介导的神经炎

症发挥抗抑郁作用的机制。

方法：

1.基于LC/MS非靶向脂质组学技术对正常大鼠、CUMS大鼠、当归治疗组大鼠

的海马组织进行脂质组学分析，同时采用Westernblot测定各组大鼠海马ASMase的

表达量，明确当归对CUMS大鼠中枢系统ASM/Cer通路关键代谢物及代谢酶的调节

作用。采用酶联免疫吸附测试（ELISA）检测大鼠海马组织IL-1β、IL-6和TNF-α的

水平，考察当归对CUMS大鼠中枢系统炎症反应的调节作用。进一步采用关联分析

方法探讨当归调节ASM/Cer通路与炎症因子指标的相关性，明确当归调节CUMS大

鼠中枢系统ASM/Cer通路抑制神经炎症的抗抑郁潜在机制。

2.以SD大鼠为供体制备含药血清，采用UPLC-MS方法对当归含药血清的化学

成分进行鉴定。复制CORT损伤PC12细胞模型，将细胞分为对照组、模型组（400

μmol·L-1CORT）、当归含药血清组（5%ASDS,7.5g生药/kg）、ASMase抑制剂组

（10μmol·L-1LY-110140）、当归含药血清+ASMase抑制剂组（5%ASDS+10μmol·L-

I

1LY-110140）、阳性药含药血清组（5%FLXDS，6mg/kg），通过CCK-8检测细胞存

活率、微板法检测LDH释放率、流式细胞术检测细胞凋亡率评估当归对CORT损伤

的PC12细胞的保护作用，明确当归通过调节ASM/Cer通路发挥神经保护作用的机

制。采用Westernblot和免疫荧光染色技术分析各组细胞ASMase的表达情况，采用

ELISA试剂盒检测Cer的含量，验证当归对ASM/Cer通路的调节作用。分别采用

Westernblot和ELISA分析细胞NLRP3炎症小体通路相关蛋白表达量和炎症因子IL-

1β、IL-6、TNF-α含量，明确当归通过调节ASM/Cer通路介导的NLRP3炎症小体通

路，抑制神经炎症发挥抗抑郁作用的生物学机制。

结果：

1.研究结果发现，与对照组相比，CUMS模型大鼠海马的脂质代谢轮廓发生了

显著变化，经过筛选鉴定，初步确定31种与抑郁症相关的脂质差异代谢物。当归干

预后，其中23种代谢物显著回调，包括1种溶血磷脂酰胆碱类（LPC）、1种二酰基

甘油（DG）、9种磷脂酰胆碱（PC）、5种磷脂酰乙醇胺（PE）、3种神经酰胺类

（Cer）、1种鞘磷脂类（SM），表明当归可以调节CUMS大鼠海马异常变化的

ASM/Cer通路关键代谢物。蛋白免疫印迹分析结果表明，与正常大鼠相比，CUMS

大鼠海马中ASMase表达显著增加，当归给药后，ASMase表达被显著回调，表明当

归可以调节