黄芩汤改善SNI致神经病理性疼痛的药效作用及抑制小胶质细胞极化机制研究.pdf

中文摘要

选题依据：神经病理性疼痛（Neuropathicpain,NP）发病率呈逐年上升趋势，严

重影响患者健康。神经病理性疼痛的病理机制复杂，包括外周敏化、中枢敏化、离子

通道改变和脊髓胶质细胞的活化等。脊髓中活化的M1/M2小胶质细胞促进多种细胞

表面受体和炎症因子的产生和释放，在神经病理性疼痛发生发展中起到重要作用，

M1M2

因此，抑制小胶质细胞激活和促进向极化模式的转变是神经病理性疼痛的潜

在治疗方法。已有证据表明，肠道微生物群紊乱和代谢改变与神经病理性疼痛有关，

且代谢物能影响小胶质细胞的代谢和功能。黄芩汤（HuangqinDecoction,HQD）具

有清热止痢、和中止痛的功效，临床上用于治疗腹泻、溃疡性结肠炎和肝癌等疾病。

现代研究表明黄芩汤主要成分如黄芩苷、芍药内酯、甘草苷等对疼痛有改善作用，

但黄芩汤能否缓解神经病理性疼痛尚不清楚。

sparednerveinjury,

目的：本研究旨在探究黄芩汤对坐骨神经分支选择性损伤（

SNI）诱导神经病理性疼痛小鼠的镇痛作用，揭示其缓解神经病理性疼痛的作用是否

与调节小胶质细胞极化有关。

1SNI

方法：、选择坐骨神经分支选择性损伤（）致小鼠神经病理性疼痛模型，

SNI5g/kg10g/kg20g/kg

分组如下：对照组、组、黄芩汤、黄芩汤、黄芩汤、普瑞

巴林25mg/kg。通过触觉针、冷热板、热辐射仪、转棒实验评估小鼠机械痛阈、热痛

HESNI

阈、冷痛阈及运动协调能力的变化，同时根据染色结果，研究黄芩汤改善

小鼠疼痛相关行为及病理损伤的作用。

2、通过免疫荧光和蛋白免疫印迹检测小胶质细胞极化相关的标志物（Iba-1、

CD68CD206iNOSELISAIL-4IL-10IL-6

、、）的表达水平，并通过测定炎症因子（、、、

TNF-α）水平，揭示黄芩汤调节SNI小鼠疼痛模型脊髓中小胶质细胞极化的作用。

3、通过ELISA和蛋白免疫印迹检测肠道损伤相关标志物（LBP、Claudin1、

Occludin）的表达水平，考察黄芩汤对SNI小鼠肠道屏障的保护作用。采用

UPLC-QTOF-MS代谢组学技术对肠道内差异代谢物进行筛选，并与小胶质细胞极化

相关的炎症因子（IL-4、IL-10、IL-6、TNF-α）进行相关性分析，结合疾病状态与药

物干预状态下的代谢物代谢物相关性网络，预测黄芩汤调节小胶质细胞极化与改善-

肠道代谢物异常的相关性。

4、采用LPS诱导BV-2细胞神经炎症模型对筛选出的关键代谢物进行验证，通

I

过测定细胞活力、NO、IL-6、IL-4水平；以及免疫荧光实验检测CD68、CD206表

达，验证关键代谢物对LPS诱导BV-2细胞M1/M2极化的影响。

1SNI7

结果：、行为学结果表明，手术天后小鼠的机械痛阈值、热痛阈值、冷

痛阈值和运动协调能力明显下降。给予黄芩汤（10g/kg、20g/kg）28天后可显著改

SNI20g/kg28

善小鼠的机械痛阈、热痛阈和运动协调能力，其中黄芩汤给药天可

SNI