2.3 动物细胞核移植技术及其应用（课时1）课件高二下学期生物学苏教版选择性必修3.pptx

2.3课时1动物细胞核移植技术及其应用

1.能说出动物细胞核移植的概念和原理。2.能概述体细胞核移植的过程。3.能举例说出体细胞核移植技术的应用前景，以及分析技术存在的问题。

1907195119581959197518901974年，小鼠的桑椹胚被成功分割。次年，科学家分割绵羊胚胎获得了同卵羔羊。1975年，米尔斯坦和科勒等创立了单克隆抗体技术1959年，试管家兔诞生。之后，多种试管动物相继出生。1958年，格登用非洲爪蟾进行体细胞核移植实验，成功培育出性成熟个体。同一时期，我国科学家童第周等开展了鱼类细胞核移植工作。1951年，张明觉等发现了哺乳动物精子的获能现象,希普将安哥拉兔的胚胎移入比利时兔的输卵管内，得到了两只安哥拉兔。这是世界上胚胎移植成功的首例。1907年哈里森用一滴淋巴液成功培养了蝌蚪的神经元，首创了动物组织体外培养法199619812006201720141981年，埃文斯等成功分离和培养了小鼠的胚胎干细胞。1996年，世界上第一只体细胞克隆羊多莉在英国诞生，随后多种克隆动物相继问世。2006年，山中伸弥等获得了诱导多能干细胞。我国科学家用这种细胞培育出了小鼠。2014年，世界上第一个用单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿在我国诞生。2017年，我国科学家首次培育了体细胞克隆猴。动物细胞工程的发展历程

动物细胞培养动物细胞融合生产单克隆抗体动物细胞核移植动物细胞工程常用技术动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。干细胞技术动物细胞工程技术

这个实例证明了什么？1996年7月，英国科学家维尔穆特等人采用成年绵羊的乳腺细胞（动物体细胞）进行核移植，成功培育出世界上首例体细胞核移植克隆羊多莉。积极思维：为什么克隆羊多莉会轰动全世界？哺乳动物体细胞核在卵母细胞细胞质的支持下，具有全能性。

“多莉”是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物。这一巨大进展证明了分化了的动物细胞核具有全能性。积极思维：为什么克隆羊多莉会轰动全世界？

问题我们能否利用类似植物组织培养获得完整植物体的方法培养动物细胞，使其发育成一个完整的个体？不能，高度分化的植物细胞仍保持着全能性，而动物细胞的全能性会随细胞分化程度的提高逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。因此，目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，用动物体细胞克隆的动物，实际是通过核移植来实现的。

1.概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。2.原理：动物细胞核的全能性4.种类：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，表现全能性容易细胞分化程度高，表现全能性十分困难3.生殖方式：无性生殖一、动物细胞核移植技术——减数分裂Ⅱ中期的卵母细胞供体——提供细胞核的细胞受体因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植

二、体细胞核移植的过程从屠宰场收集牛卵巢，采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期高产奶牛（供体）从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞，进行培养正常排出的卵子即处于MⅡ期，此时卵母细胞已发育成熟，细胞质中具有激活重构胚以及早期胚胎发育的必需因子。一般选用传代10代以内的细胞，因为10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型，保证了供体细胞正常的遗传基础。为什么选择卵母细胞作为受体细胞？卵母细胞体积，易操作；卵母细胞的细胞质中含有激发细胞核表达的物质；大全能性卵母细胞内卵黄多，营养物质丰富。供体：提供细胞核的个体；有重要利用价值的动物的体细胞。

从屠宰场收集牛卵巢，采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期高产奶牛（供体）从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞，进行培养显微操作去核实质：纺锤体-染色体复合物去核原因：使克隆动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞。去核方法：目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作法，也有人采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。这些方法是在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变性。*去核时，由于MⅡ期卵母细胞核的位置靠近第一极体，用微型吸管一般一并吸出第一极体

从屠宰场收集牛卵巢，采集卵母细胞，在体外培养到MⅡ期高产奶牛（供体）从供体高产奶牛身体的某一部位(如耳)上取体细胞，进行培养显微操作去核将供体细胞注入去核卵母细胞将供体细胞直接注入去核卵母细胞能够提高成功率，且操作简便。

用物理或化学方法（电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程胚胎植入