3.2 基因工程的基本操作程序（第二课时） 课件高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

第3章基因工程第2节基因工程的基本操作程序

深度学习自主学习导入新课迁移应用1.为什么要构建基因表达载体？3.如何构建基因表达载体？阅读教材P80，回答下列问题：2.基因表达载体一般由哪些部分组成？一基因表达载体的构建二

一基因表达载体的构建二☆基因表达载体的构建是基因工程的核心工作。1.目的基因表达载体的作用：①让目的基因在受体细胞中稳定存在，并遗传给下一代；②使目的基因能够表达和发挥作用。深度学习自主学习导入新课迁移应用基因表达载体应该具备什么结构才能到达以上目的？

Bt基因（目的基因）基因表达载体如果目的基因需要复制需要什么结构？复制原点如果目的基因需要表达需要什么条件？需要启动子和终止子启动子和终止子应该加在哪？启动子位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用

一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用启动子的类型根据启动子的转录模式，可分为：①组成型启动子②组织特异性启动子③诱导型启动子

如外源基因在整株植物中表达，产生大量异源蛋白质或代谢产物在植物体内积累，打破了植物原有的代谢平衡，有些产物对植物并非必需甚至有毒，因而阻碍了植物的正常生长，甚至导致死亡；一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用启动子的类型根据启动子的转录模式，可分为：①组成型启动子②组织特异性启动子③诱导型启动子能够调控基因的表达，使其基本恒定在一定程度上，从而使基因在不同部位或组织中的表达水平不存在明显差异。这类启动子一般来自管家基因，可连续不断地启动基因的表达。可能存在问题：

一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用启动子的类型根据启动子的转录模式，可分为：①组成型启动子②组织特异性启动子③诱导型启动子其调控作用使得基因往往只在某些特定器官或组织中表达，且表现出发育调节的特性。其启动的外源基因在受体中仅在需要的部位特异表达，克服了组成型启动子启动的外源基因在受体植物中非特异、持续、高效表达所造成的浪费，增加了转基因的效果。最大的优势：P90

一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用启动子的类型根据启动子的转录模式，可分为：①组成型启动子②组织特异性启动子③诱导型启动子当诱导物存在时，可以激活或抑制目的基因的表达。P80如：光诱导表达基因启动子、热诱导表达基因启动子、创伤诱导表达基因启动子、真菌诱导表达基因启动子和共生细菌诱导表达基因启动子等。

Bt基因（目的基因）基因表达载体如果目的基因需要复制需要什么结构？复制原点如果目的基因需要表达需要什么条件？需要启动子和终止子启动子和终止子应该加在哪？启动子终止子位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用位于基因的下游；终止转录。

Bt基因（目的基因）基因表达载体复制原点启动子终止子位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用位于基因的下游；终止转录。基因表达载体还应具有什么结构？标记基因便于重组DNA分子的筛选和鉴定。

Bt基因（目的基因）基因表达载体复制原点启动子终止子位于基因首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA。一基因表达载体的构建二2.组成深度学习自主学习导入新课迁移应用位于基因的下游；终止转录。标记基因便于重组DNA分子的筛选和鉴定。标记基因常见类型：抗生素抗性基因、荧光蛋白基因等。

①用一定的限制酶切割载体，使其出现一个切口。②用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段。③将切下的Bt基因片段拼接到载体的切口处，再加入适量DNA连接酶，形成了一个重组DNA分子。载体基因表达载体3.构建过程深度学习自主学习导入新课迁移应用一基因表达载体的构建二

质粒EcoRⅠ酶切位点3.构建过程深度学习自主学习导入新课迁移应用一基因表达载体的构建二

Bt基因！EcoRⅠ酶切位点EcoRⅠ酶切