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青霉素酰化酶转化填充床反应器连续生产(R)-1,3-丙二醇b.固定化生物催化剂在异丙醇-水溶液体系中进行不对称氢转移生物还原底物4-羟基-2-丁酮5%产物(R)-1,3-丁二醇49.5g/l光学纯度99%e.e.转化率为99%反应器稳定工作500h反应器的生产率约为750mg/h/10ml(催化剂)(NobuyaItoh,2007)a.固定化E.coli细胞生物催化不对称氧化还原CO2合成甲醇(Ei-Zahab,etal.2008;MatsudaT.etal.2009)四种酶,包括甲酸、甲醛、乙醇和谷氨酸脱氢酶共固定化在一种颗粒上辅酶NADH固定在另颗粒上向两种固定化颗粒的悬浮液中通CO2气体进行反应实现了辅酶的内部循环该固定化系统表现出较好的循环使用的稳定性酶和辅酶共固定化E1E2*1.原料利用率提高:48%→~100%2.产品质量提高:主要体现在ee值由化学法的99.0%左右提高到生物催化法的大于99.5%3.节能减排效果明显:工序减少、有机溶剂用量减少、三废排放减少*1.原料利用率提高:48%→~100%2.产品质量提高:主要体现在ee值由化学法的99.0%左右提高到生物催化法的大于99.5%3.节能减排效果明显:工序减少、有机溶剂用量减少、三废排放减少*1.原料利用率提高:48%→~100%2.产品质量提高:主要体现在ee值由化学法的99.0%左右提高到生物催化法的大于99.5%3.节能减排效果明显:工序减少、有机溶剂用量减少、三废排放减少Chapter5
ImmobilizedEnzymeandCell固定化酶和细胞制作:郑穗平酶的稳定性较差:除了某些耐高温的酶,如α-淀粉酶、Taq酶等;和胃蛋白酶等可以耐受较低的pH条件以外,大多数的酶在高温、强酸、强碱和重金属离子等外界因素影响下,都容易变性失活。酶的一次性使用:酶一般都是在溶液中与底物反应,这样酶在反应系统中,与底物和产物混在一起,反应结束后,即使酶仍有很高的活力,也难于回收利用。这种一次性使用酶的方式,不仅使生产成本提高,而且难于连续化生产。产物的分离纯化较困难:酶反应后成为杂质与产物混在一起,无疑给产物的进一步的分离纯化带来一定的困难。固定化技术0102酶应用过程中的主要瓶颈Contentsofchapter51、什么是固定化技术和固定化酶2、固定化酶的研究历史3、酶的固定化技术4、固定化酶的特点GoGoGoGo6、细胞、原生质体的固定化,自学5、固定化酶的应用Go水溶性酶水不溶性载体水不溶性酶(固定化酶)固定化技术1什么是固定化酶?酶的固定化技术和固定化酶化学偶联酶固定化间歇可溶交联包埋吸附间歇连续固定化酶的三种形式固定化酶:经提取和分离纯化后的酶固定化菌体(死细胞):含酶菌体或菌体碎片固定化细胞:在一定的空间范围内进行生命活动的细胞优点:不溶于水,易于与产物分离;可反复使用;可连续化生产;稳定性好。缺点: 1.固定化过程中往往会引起酶的失活2.固定化酶在化学催化反应中存在空间位阻固定化酶的研究从50年代开始,1953年德国的Grubhofer和Schleith采用聚氨基苯乙烯树脂为载体与羧肽酶、淀粉酶、胃蛋白酶、核糖核酸酶等结合,制成固定化酶。01在1971年召开的第一次国际酶工程学术会议上,确定固定化酶的统一英文名称为Immobilizedenzyme。0360年代后期,固定化技术迅速发展起来。1969年,日本的千烟一郎首次在工业上生产应用固定化氨基酰化酶从DL-氨基酸连续生产L-氨基酸,实现了酶应用史上的一大变革。022固定化酶的研究历史在固定化酶和固定化菌体的基础上,70年代后期出现了固定化细胞技术。1976年,法国首次用固定化酵母细胞生产啤酒和酒精,1978年日本用固定化枯草杆菌生产淀粉酶,开始了用固定化细胞生产酶的先例。本章随着固定化技术的发展,出现固定化菌体。1973年,日本首次在工业上应用固定化大肠杆菌菌体中的天门冬氨酸酶,由反丁烯二酸连续生产L-天门冬氨酸。1982年,日本首次研究用固定化原生质体生产谷氨酸,取得进展。固定化原生质体由于解除了细胞壁的障碍,更有利于胞内物质的分泌,这为胞内酶生产技术路线的变革提供了新的方向。目录活性中心:保护酶的催化作用,并使酶的活性中心的氨基酸基团固有的高级结构不受到损害,在制备固定化酶时,需要在非常严密的条件下进行。01功能基团:如游离的氨基、羧基、半胱氨酸的巯
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