多聚酶链式反应扩增DNA片段 教案.docx

多聚酶链式反应扩增DNA片段教案

??一、教学目标

1.知识目标

简述PCR技术的基本原理。

说出PCR的反应过程。

概述PCR技术的条件、特点及应用。

2.能力目标

通过对PCR技术原理和过程的学习，培养学生分析、归纳和总结的能力。

尝试运用PCR技术的相关知识，解决实际问题，提高学生的知识迁移能力和实践操作能力。

3.情感态度与价值观目标

关注PCR技术在现代生物学研究和实际应用中的重要作用，体会科学技术对社会发展的巨大推动作用，激发学生对生命科学的兴趣。

通过小组讨论和合作学习，培养学生的团队协作精神和创新思维，增强学生的科学探究意识。

二、教学重难点

1.教学重点

PCR技术的基本原理。

PCR的反应过程。

2.教学难点

PCR技术的原理，尤其是DNA变性、复性和延伸的过程。

三、教学方法

讲授法、讨论法、多媒体演示法、问题引导法

四、教学过程

（一）导入（5分钟）

1.创设情境

通过多媒体展示刑侦人员利用DNA指纹技术破案的图片或视频片段，引出DNA分析在现代社会中的重要性。提问学生：在实际应用中，有时需要大量特定的DNA片段，如何快速获得呢？从而导入本节课的主题多聚酶链式反应扩增DNA片段。

2.引导思考

提出问题：如果让你来设计一种方法大量扩增DNA片段，你会从哪些方面入手？鼓励学生积极思考，发表自己的初步想法，激发学生的学习兴趣和探索欲望。

（二）PCR技术的基本原理（15分钟）

1.讲解概念

介绍PCR（PolymeraseChainReaction）即多聚酶链式反应，是一种在生物体外快速扩增特定DNA片段的核酸合成技术。它能以极少量的DNA为模板，在短时间内复制出大量的DNA片段。

2.类比说明

将PCR技术类比为一个DNA复印机，形象地解释其作用原理。以一段特定的DNA序列为例，说明PCR技术如何在体外模拟细胞内DNA复制的过程，快速合成大量相同的DNA片段。

3.深入剖析

DNA变性：利用DNA的热变性原理，当温度升高到9095℃时，双链DNA解旋为单链，这一过程称为变性。通过多媒体动画展示DNA双链解开的动态过程，帮助学生理解。

引物结合：温度降低到5560℃时，两种引物通过碱基互补配对分别与两条单链DNA模板结合，这一过程称为复性。解释引物的作用，引物是一小段单链DNA或RNA，它能为DNA聚合酶提供起始合成的3OH末端，引导DNA合成。

DNA延伸：将温度调至7075℃，耐热的DNA聚合酶（如Taq酶）从引物的3OH端开始延伸DNA链，按照碱基互补配对原则，合成新的DNA链。展示DNA延伸过程的示意图，清晰呈现新链合成的方向和过程。

4.总结归纳

强调PCR技术的原理是基于DNA变性、复性和延伸三个基本步骤的循环进行，每一次循环都使DNA片段的数量呈指数增长。引导学生总结这三个步骤的关键条件和特点，加深对PCR原理的理解。

（三）PCR的反应过程（20分钟）

1.反应体系介绍

介绍PCR反应体系的主要成分，包括模板DNA、引物、dNTP（四种脱氧核苷酸）、Taq酶、缓冲液等。通过图表形式详细列出各成分的作用，例如：

模板DNA：提供扩增的原始模板。

引物：引导DNA合成的起始点。

dNTP：作为合成DNA的原料。

Taq酶：催化DNA链的延伸反应。

缓冲液：维持反应体系的pH值和离子强度，保证酶的活性。

2.反应步骤讲解

以一个典型的PCR反应为例，详细讲解其具体步骤：

变性阶段：将反应体系加热至9095℃，使模板DNA双链解开，持续1530秒。

复性阶段：温度降至5560℃，引物与模板DNA结合，持续2040秒。

延伸阶段：升温至7075℃，Taq酶催化DNA链的延伸，根据扩增片段的长度，延伸时间一般为30秒至数分钟不等。

强调每个阶段的温度控制和时间设置对PCR反应结果的重要性，并解释其原因。

3.循环次数说明

指出PCR反应一般需要进行2530次循环。随着循环次数的增加，目的DNA片段的数量呈指数增长。通过简单的数学计算，让学生了解经过n次循环后DNA片段的扩增倍数，进一步加深对PCR高效扩增能力的认识。

4.动画演示

利用多媒体动画，动态展示PCR反应全过程，从反应体系的准备到每个循环中DNA变性、复性和延伸的具体过程，让学生直观地观察到PCR反应的动态变化，增强对知识的理解和记忆。

（四）PCR技术的条件、特点及应用（15分钟）

1.PCR技术的条件

温度控制：强调不同反应阶段对温度的严格要求，如变性温度9095℃、复性温度5560℃、延伸温度7075℃，这是保