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動物克隆技術的發展經歷從胚胎細胞的克隆（包括胚胎切割）到體細胞克隆的過程胚胎細胞克隆技術產生的新個體並非是親代的自我複製，而是多生了幾個雙胞胎，並未引起世人注意。體細胞克隆可達到親代個體的自我複製。?□核移植技術將供體複製對象的細胞核轉入到去掉細胞核的卵細胞中。由於體細胞包含有全部的遺傳資訊，可以從體細胞獲得完整的動物個體。克隆羊“多莉”的誕生說明動物體細胞也具有全能性，因此它是真正意義上的動物克隆，動物克隆的基本過程以克隆羊為例，動物克隆的基本過程如下圖?克隆動物的應用：1.快速克隆出優良的種畜和遺傳上一致的實驗動物；2.動物資源的種質保存，包括地球上頻危動物的挽救等（異種核移植）；3.生產移植器官；4.與轉基因技術相結合研製生物反應器生產基因藥物。轉基因體細胞克隆技術比轉基因動物（通過原核注射）的方法優越：後者整合率和表達率低，經常出現嵌合體。?5.克隆人。是全世界注目的焦點，有人設計了克隆人的技術路線動物克隆中急待解決的問題1.成功率低(1-3%)2.供體核和受體胞質細胞週期的同步化是影響克隆胚胎發育的重要因素.3.線粒體來源的問題:發現有些克隆動物的線粒體(mtDNA)為雜合體,既有受體胞質的,也有供體細胞來的.4.端粒酶的問題：正常細胞沒有端粒酶，所以端粒會隨著細胞分裂而變短，細胞衰老。那麼克隆動物是否會隨著供體細胞的縮短的端粒而提前衰老呢？有發現Dolly羊的端粒限制性片段平均長度（meanterminalrestrictionfragment,TRF)比同齡對照短。供體細胞培養時間越長，TRF越短.□???動物克隆的危險性：1．克隆動物已出現廣泛的免疫缺陷或早期夭亡。2．克隆動物過程中也極有可能產生遺傳性的變異（無性系變異），這在植物的克隆中已廣泛得到研究和驗證（會發生染色體變異，基因組DNA擴增和某些轉位因數的啟動）。第七節遺傳病——基因診斷和基因治療

重組病毒的Southern雜交鑒定，hGHcDNA整合進杆狀病毒基因組的正確位置中表達產物的SDS與Western-blot分析三、植物基因工程□定義：將外源目的基因導入體外培養的植物組織或細胞，通過組織或細胞培養使之發育成完整的再生植株——轉基因植株。1.冠癭瘤——天然的植物基因工程自然界某些植物受到農桿菌的侵染會形成腫瘤——冠癭瘤。其形成的機理是由於農桿菌中含有的一種誘發腫瘤的質粒所引起的，稱為Ti質粒（tumor-inducingplasmid，簡稱Ti質粒）。Ti質粒上的一段DNA能轉移到侵染的植物部位細胞中，並插入到植物染色體中，由於該片段（稱T-DNA）上具有誘發腫瘤的基因，所以能誘發植物產生腫瘤。T-DNATumorproductionNopalinesynthesisT-DNAtransferfunctionNopalineutilizationOriginofreplicationTiplasmidTi質粒（胭脂堿型）簡圖冠癭瘤——天然的植物基因工程2.農桿菌Ti質粒作為植物基因工程載體科學家根據冠癭瘤形成的分子機理，通過改建農桿菌Ti質粒，使Ti質粒中的致瘤基因失活，同時插入目的基因，使之成為基因工程載體。通過感染轉化植物組織和細胞，並使之培養成完整的植株。CointegrateTi-plasmidTobaccoplantcellTrasformedcellCulturedcellPlantletTransgenictobaccoplantCelloftransgenicplant植物基因工程程式圖3.抗除草劑基因工程(Genetransferofglyphosateresistance)草甘膦在低濃度時非常有效，對人無毒，可被土壤中微生物分解。草甘膦能被植物細胞的葉綠體的酶（EPSP合成酶）所分解，該酶對細菌和植物中的氨基酸的合成很重要，沒有這種酶的作用，植物就會乾枯和死亡。從抗草甘膦的細菌中分離和克隆EPSP合成酶的基因和抗除草劑基因工程抗除草劑基因工程示意圖首先從抗草甘膦的細菌中分離和克隆EPSP合成酶基因，再進行植物抗除草劑基因工程Genetransferofglyphosatere