分光光度计基本原理与结构.pptVIP

聚光镜为一凸透镜。点光源发出的光，经聚光镜后，变成平行光，然后再进入棱镜（或光栅）色散系统。色散后的平行光再经聚光镜会聚后，照射到比色皿上。准直镜和聚光镜：准直镜用来减小光束的尺寸并提供平行光，其多由凹面镜制成。凹面镜的反射镜面大都是镀铝的。在可见光区，铝膜外面常常再镀上一层SiO2保护层。但在紫外区，为了保证较高的反射效率。常常不镀此SiO2保护膜，这种准直镜的维护方法与光栅相同。分光光度计的光学系统简介分光光度计的光学系统有许多类型，不同类型的光学系统，对测量方法和结果都有一定影响，下面，我们介绍几种常用分光光度计的光学系统。（－）单光束光学系统：它是分光光度计中最简单的和应用最普遍的一种。它的特点是只有一条光束。通过交换参比和样品的位置，使其分别进入光路。在参比（溶剂）进入光路时，调零。然后将样品进入光路的信号和参比信号进行比较，就可在显示器上读出样品的透过率和吸光度。结构如图4－6所示。国产754型、WFD－SA型、WFZ800D型分光光度计，以及国外的贝克曼DU型、岛津QC－50、QR－50、日立EPU－2A型、希尔格H700型、C－4型等都属于这种类型的仪器。单光束分光光度计由于在每个波长都需要变换参比和样品的位置，所以只能手动，不能扫描吸收光谱。它的结构比较简单，使用也有一定限制，但如配置程序控制和打印装置，则对一些常规的定量测定（如医院化验室）还是比较适用的。双光束光学系统：单光束分光光度计虽简单价廉，但有如下缺陷：即它要求在整个测定过程中光源必须稳定不变；另外光电转换器和放大器如有不规则的特性会给测量结果带来误差。为克服上述缺点，设计了双光束分光光度计。其结构示意图如图4-7所示。*分光光度计基本原理与结构许多化学物质具有颜色，有些无颜色的化合物也可以与显色剂作用，生成有色物质。实践证明，有色溶液的浓度越大，颜色越深；浓度越小，颜色越浅。因此，可以通过比较溶液颜色深浅的方法来确定有色溶液的浓度，对溶液中所含的物质进行定量分析。基于比较颜色深浅对溶液进行定量分析的方法称为比色分析法。溶液为什么会有颜色，颜色又为什么与浓度有关呢？下面就讨论这个问题。光的互补及有色物质的显色原理光的波粒二象性光是能的一种表现形式，是电磁波的一种。光在真空中以直线方式传播，在不同的介质处发生反射、折射、衍射、色散、干涉和偏振等现象。可用波长、频率、传播速度等参量来描述，即光具有“波动性”。光的颜色即由光的波长决定，人眼能感觉到的光称为可见光，其波长在400～750nrn之间。在可见光之外是红外光和紫外光。同时，光也具有“粒子性”，光电效应就是一个很好的例子。光的粒子性理论认为，光是由“光子”（或称“光量子”）所组成。在辐射能量时，光是以一份一份的能量E的形式辐射的，同时光被吸收时，能量也是一份一份被吸收的。这每一份能量的大小为hυ。光子的能量与波长的关系为E=hυ=hc／λ式中E为光子的能量（J：焦耳），υ为频率，h为普朗克常数（6.63×10-34J?S），c为光速，λ为光的波长因此，不同波长的光，其能量不同，短波能量大，长波能量小。2。光的显色原理若把某两种颜色的光，按一定的强度比例混合，能够得到白色光，则这两种颜色的光叫做互补色。图4－1中处于直线关系的两种光为互补色。如绿光和紫光为互补色，黄光和蓝光为互补色等等。各种溶液会呈现出不同的颜色，其原因是溶液中有色质点（分子或离子）选择性地吸收某种颜色的光。实验证明：溶液所呈现的颜色是其主要吸收光的互补色。如一束白光通过高锰酸钾溶液时，绿光大部分被选择吸收，其它的光透过溶液。从互补色示意图可以看出，透过光中只剩下紫色光，所以高锰酸钾溶液呈紫色。朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律溶液颜色的深浅与浓度之间的关系可以用吸收定律来描述。它是由朗伯定律和比尔定律相结合而成的，所以叫朗伯-比尔定律。原子吸收分光光度计也符合这个定律。溶液对光的吸收当一束强度为I的平行单色光照到溶液时，一部分光被溶液吸收，一部分光被界面散射，其余的光则透过溶液，如图4-2所示有：I0=Ia+Ir+ItI0--入射光强度Ia--吸收光强度Ir--反射光强度It--透射光强度通常由于Ir很小可忽略不计，上式可简化为I0=Ia+It透射光It与入射光强度I0之比为透光率或透光度，用T表示：T=It/Ia透光率的负对数称为吸光度或光密度或消光度，用A表示：A=－lgT=lg1/T=lgIa/It吸光度越大，表示该物质对光的吸收越强。透光度和吸光度都是用来表示入射光被吸收的程度，它们之间可据式相互换算。实验证明，单色光经过有色溶液时，透过溶液的光强度