重组DNA技术的基本工具课件-高二下学期生物人教版选择性必修32.pptx

1．试管牛是有性生殖还是无性生殖？克隆动物呢？体外受精技术主要包括哪些步骤？2．什么是胚胎移植？可供移植的胚胎有哪些来源？该过程谁是供体？谁是受体？胚胎移植实际上是个什么过程？其实质是什么？进行胚胎移植有何优势？3．什么是超数排卵？为何不直接注射性激素来达到目的？同期发情一般选用什么激素？4．什么是胚胎分割？胚胎分割技术属于无性繁殖还是有性繁殖？什么样的胚胎适合进行胚胎分割？囊胚阶段的胚胎要进行分割要特别注意什么？胚胎移植前的性别鉴定，通常选择什么部位的细胞？5．胚胎分割的成功率与分割次数有何关系？还存在哪些问题？温故知新

第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具1.基因工程技术需要哪些工具？2.重组DNA技术的基本工具有哪些作用？本节聚焦：

“萤火虫”植物会发光，未来代替路灯从社会中来

思考：1.科学家通过什么操作使植物发光？2.该方法是否可以使植物持续发光？3.植物的发光性状是否可以遗传给后代？科研人员通过纳米粒子将荧光素酶直接注入到植物体内使植物发光，但这种方法只能使植物持续发光四小时，并且这种发光性状是不能遗传给后代的。从社会中来

基因工程——是指按照人们的愿望，通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫作重组DNA技术。原理：优点：基因重组定向改造生物体的性状

1.基因工程的原理、操作水平、操作结果、场所？2.为什么不同生物DNA分子能够连接起来？为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？3.重组DNA技术的三种工具？4.限制酶的来源、作用、结果？限制酶存在于原核生物中的作用？为什么不会切割自身的DNA？5.DAN连接酶的作用、分类？与DNA聚合酶的区别？6.质粒的本质？载体需要具备的条件？载体的分类、不同点？7.如何防止目的基因自身环化、目的基因反向拼接、质粒自身环化？8.DNA粗提取的原理？研磨的目的?低温放置的目的？9.为什么不能选哺乳动物成熟的红细胞？10.二苯胺试剂的使用条件？自主预习

重组DNA技术的基本工具“分子手术刀”“分子缝合针”“分子运输车”如何利用相关工具获得发出荧光的转基因植物？

1.以下为“萤火虫”的DNA序列（仅展示一部分）。2.观察该序列，思考选择哪一种工具获取荧光素酶基因？限制性内切核酸酶(限制酶)——“分子手术刀”3’...GGGCCCCTTAAG...AGCT...CTTAAGAGTTGT...5’5’...CCCGGGGAATTC...TCGA...GAATTCTCAACA...3’荧光素酶基因任务一：如何获取荧光素酶基因呢？

脱氧核糖A磷酸脱氧核糖G磷酸脱氧核糖T磷酸T磷酸脱氧核糖C磷酸脱氧核糖A磷酸脱氧核糖磷酸二酯键氢键知识回顾——DNA限制酶作用的是什么化学键？

（一）限制酶的作用：ATCGTAGC5’3’5’3’1、识别双链DNA分子的特定核苷酸序列；2、使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”特点：具有特异性大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成。也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

（二）限制酶的来源：主要来自原核生物。限制酶能破坏外源DNA，如侵染细菌的噬菌体DNA，“限制”病毒在细菌内的寄生，而细菌自身DNA经过相应的化学修饰则不会被限制酶破坏。一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

实例1——科学家在大肠杆菌中分离得到了一种限制酶，称为EcoRⅠ*EcoRⅠ识别序列为GAATTC*EcoRⅠ可切割识别序列中轴线两侧的GA之间的磷酸二酯键黏性末端黏性末端一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”（三）限制酶的作用结果：

现学现用：写出下列限制酶切割形成的黏性末端BamHⅠ________EcoRⅠ________HindⅢ________BglⅡ________GATCAATTAGCTGATC结论：1.不同的限制酶切割形成的黏性末端一般不同；2.不同的限制酶可能切割形成相同的黏性末端。

当限制酶在它识别序列的中轴线处将DNA分子的两条链分别切开时，产生的是平末端。SmaI平末端CGCCGGGCGCGC5335CGCCGGGCGCGC识别序列：CCCGGG切割部位：CG之间一、限制性内切核酸酶——“分子手术刀”

例1.下表为常用的限制性核酸内切酶及其识别序列和切割位点(注:表中Y为C或T,R为A或G)。据图分析,可以得到的结论是()A.限制酶的切割位点都在识别序列的中间B.限制酶切割后都形成黏性末端C.不同限制酶识别的序列不同所以切割后形成的末