2024_2025学年高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数教案新人教版选修1.docVIP

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课题2土壤中分解尿素的细菌的分别与计数

一、教学目标

1.驾驭筛选微生物的试验原理，对分别不同微生物能娴熟配制不同的选择培育基

2.分析探讨思路的形成过程，为本节课的细菌筛选供应思路启迪

3.驾驭微生物培育过程的无菌操作

二、教学重点

1.对土样的选取和选择培育基的配制

2.试验流程的设计

三、教学难点

对分解尿素的细菌的计数

四、教学方法

启发式教学

五、教学工具

多媒体课件

六、教学过程

（一）新课引入

1.尿素是一种重要的氮肥，农作物不能干脆汲取利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2，这是因为细菌能合成脲酶。

2.在体外将DNA大量复制的扩增技术被称为DNA多聚酶链式反应，该技术的自动化须要用到一种酶———耐高温的DNA聚合酶，我们应当从哪去找寻这种酶呢？到高温环境中去找，聪慧的科学家从热泉中找到了一种耐热细菌Taq，从中筛选出了耐高温的TaqDNA聚合酶，是因为：热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物，那么这个过程是否可以给我们一种思路，这种分解尿素的细菌应当如何分别出来？

（二）内容讲解

1.试验基础学问点讲解

1.1试验室中微生物得筛选原理：人为供应有利于目的菌株生长的条件（包括养分、温度、PH等），同时抑制或阻挡其他微生物生长。

生物适应肯定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培育基、限制培育条件等选择目的微生物。

1.2据教材22页左上角的培育基配方回答下列问题：

〖思索1〗在该培育基配方中，为微生物的生长供应碳源的是葡萄糖，供应氮源的的是尿素，琼脂的作用是凝固剂。

〖思索2〗该培育基对微生物具有选择作用。其选择机制是只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培育基上生长。

1.3在统计菌落数目时，常用来统计样品中活菌数目的方法是稀释涂布平板法。除此之外，显微镜干脆计数法也是测定微生物数量的常用方法。

1.4采纳稀释涂布平板法统计菌落数目时，培育基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推想出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果精确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。

〖思索3〗从平板上的菌落数推想出每克样品中的菌落数的计算方法是（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数。

〖思索4〗利用稀释涂布平板法胜利统计菌落数目的关键是正确的选择稀释度。

〖思索5〗教材22页案例一，哪位同学的结果更接近真实值？你认为这两位同学的试验须要改进吗？假如须要，如何改进？

第二位同学的结果接近真实值。这两位同学的试验都须要改进：第一位同学需设置重复试验组；其次位同学统计的三个菌落数相差太大，说明操作有误，需重新试验。

1.5统计的菌落数比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞在一起时，平板上视察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数来表示。

1.6设置比照的主要目的是解除试验组中非测试因素对试验结果的影响，提高试验结果的可信度。

1.7比照试验是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的试验。满意该条件的称为比照组，未满意该条件的称为试验组。

〖思索6〗教材22页案例二，你能通过设置比照，帮助A同学解除上述两个可能影响试验结果的因素吗？：

方案1：其他同学用A同学的土样进行试验。

方案2：A同学以不接种的培育基作为空白比照。

2．试验设计

2．1试验设计的内容包括试验方案、材料用具、实施步骤和时间支配等。

2．2土壤微生物主要分布在距地表3～8cm的近中性土壤中，约70％～90％为细菌。

2．3分别不同的微生物采纳不同的稀释度，其缘由是不同微生物在土壤中含量不同，其目的是保证获得菌落数在30～300之间、适于计数的平板。细菌稀释度为104、105、106，放线菌稀释度为103、104、105，真菌稀释度为102、103、104。

2．4培育不同微生物往往须要不同的培育温度。细菌一般在30～37℃培育1～2d，放线菌一般在25～28℃培育5～7d，霉菌一般在25～28℃的温度下培育3～4d。

2．5在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培育时间不足而导致遗漏菌落的数目。

点评：菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培育时间要足够，使得每个菌体都能形成肉眼可视察到的菌落。

2．6菌落的特征包括形态、大小、隆起程度、颜色等方面。

〖思索8〗土壤微生物种类最多、数量最大的缘由是什么？土壤中养分物质含量丰富，环境条件相宜等。

2．7试验过程

1）取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在运用前都要灭菌。

2）应在火焰旁称取土壤10g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。

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