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《分子生物学研究技术》第4章基因沉默与RNA干扰技术.pptx

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;2006:Silenceisgolden.

AndrewFire(left)andCraigMellolearnedthattheydwontheNobelPrizefortheirgroundbreakingdiscoveryofRNAisgene-quellingpower.;;;早在1990年,Jorgensen等在研究如何增加矮牵牛花的颜色时,观察到一种无法解释的现象:通过添加过量色素基因拷贝来增加植物花的着色,结果事与愿违,不但花未着色,反而部分花变为白色。进一步的试验表明,这些导入的基因不仅不表达,反而使植物本身的基因表达也受到了抑制,即所谓的共抑制

(cosuppression)。;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;有公司近期又推出专利产品:一个载体编码6个shRNA的构建服务,可以同时封闭2个以上的目标基因了。

晶赛公司同时推出编码shRNA(1-6个)并表达La蛋白的载体构建服务(根据已发表文献,La蛋白与siRNA干扰目标基因效果密切相关。如果La蛋白低下,siRNA效果低下甚至无效。)。;;;;;;;;;;;;;;;NATURE2000 407:21;;;;;;;;;;“Cosuppression”(RNAiofanendogenousgeneinducedbyatransgeneinsertion)wasoriginallydescribedinatransgenicpetuniasystemthatwasintendedtooverexpressthechalconesynthase(CHS)purplepigmentbiosynthesisgene(Jorgensenandco-workers,PlantCell19902:279).;AddingaChalconesynthasegenefromPetuniafusedtoastrongviralpromoter

totransgenicPetuniainterferedwithexpressionofthenativehomologous’gene.

GeneSilencing

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