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立思辰
看上去很美的文印效劳外包;调研过程;立思辰由于开盘价过高，随后一直跌途漫漫，有可能走中石油的老路;为什么说是看上去很美;什么是办公信息系统;;立思辰有哪些业务;什么是文印效劳外包;;;文印外包的钱真的很好赚么？;;;;;竞争对手看立思辰;谢谢！！;5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2mRNA表达的影响;;【关键词】食管癌;组织因子途径抑制物-2;5-氮杂-2-脱氧胞苷;甲基化;免疫组化;逆转录聚合酶链反响;凋亡
ABSTRACT：ObjectiveToexploretheeffectsof5-Aza-2-deoxycytidine(5-Aza-CdR)interventiononthegrowthandproliferationofEca9706celllineandproteinexpressionoftissuefactorpathwayinhibitor-2(TFPI-2).MethodsEca9706celllinewastreatedby5-azaCdRofdifferentconcentrations;MTT，flowcytometry，immunohistochemistryandRT-PCRwereusedtodeterminethecellgrowth，apoptosis，andtheexpressionofTFPI-2geneanditsprotein.ResultsEca9706celllinehadhypermethylationofTFPI-2.Afterdemethylationby5-Aza-CdRtreatment，theproliferationofEca9706wasinhibited，theapoptosisratewasalsoincreasedsignificantlyintheconcentration-dependentmanner.RT-PCRdetectedthatmRNAexpressionofTFPI-2geneinEca9706celllinerecoveredsignificantly(P0.05).Conclusion5-Aza-CdRcanslowthegrowthofEca9706cell，increasetheapoptosisrate，reactivatetheTFPI-2genetranscriptionandproteinexpressionbydemethylation.
KEYWORDS：esophagealcarcinoma;tissuefactorpathwayinhibitor-2;5-Aza-CdR;methylation;immunohistochemistry;RT-PCR;apoptosis;组织因子途径移植物2(tissuefactorpathwayinhibitor，TFPI-2)是丝氨酸蛋白酶抑制物，在调控肿瘤细胞浸润转移方面起着重要作用。目前，关于TFPI-2在食管癌中的基因表达情况的分析研究尚少。本研究旨在探讨TFPI-2基因的失活机制，并寻找食管癌治疗的新靶点。
1材料与方法
1.1材料
RPMI-1640培养基购自北京索莱宝生物科技;标准胎牛血清购自天津市灏洋生物制品科技;Trizol试剂购自MBI公司;RT-PCR试剂盒购自MBI公司;5-Aza-CdR购自Sigma公司;人食管癌细胞株Eca9706由郑州大学肿瘤生物学研究室惠赠。
1.2细胞培养和药物处理
人食管癌细胞Eca9706以含10mL/L胎牛血清的RPMI-1640培养基，37℃、50mL/LCO2培???箱培养，每2～3d消化传代1次。
1.3MTT法检测干预前后细胞增长率的变化
取对数生长期细胞，调整密度至5×104/mL接种于96孔板，按5-Aza-CdR浓度分为6组：0、0.4、1.6、6.4、25.6、102.4μmol/L，每组复设5个孔。待细胞贴壁后，分别于24、48、72h后参加MTT液，4h后弃去上清液，每孔加DMSO150μL，在490nm波长测定各孔吸光度值(absorbance，A)。细胞增殖抑制率(cellularproliferationinhibitionrate，CPIR)按公式计算：
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