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当细胞利用葡萄糖时,分解产物抑制酰苷酸环化酶的活性并活化磷酸二酯酶,细胞内的cAMP水平下降,CRP没有活性,Lac操纵子不能启动转录,当葡萄糖水平下降,细菌利用乳糖时,cAMP水平提高,CRP有活性,引起操纵子结构基因的转录。第63页,共129页,星期日,2025年,2月5日CRP(CAP)对Lac操纵子的作用第64页,共129页,星期日,2025年,2月5日结论:乳糖操纵子是一个双因子调节系统乳糖操纵子的表达需要2个调节蛋白的共同参与,一个是正调节蛋白CRP(CAP),一个是负调节蛋白(阻遏蛋白)。当阻遏蛋白解除后,没有CRP,基因也几乎不转录当只有CRP而阻遏蛋白没有解除时,基因不转录只有当阻遏解除且CRP存在时,基因才开始转录第65页,共129页,星期日,2025年,2月5日遗传和生化实验已证实乳糖操纵子的正确如操纵基因突变,导致阻遏蛋白无法与之结合,操纵子处于无阻遏状态,成“组成型表达”阻遏蛋白基因LacI突变,导致阻遏蛋白失活或缺乏,操纵子的结构基因转录也处于组成型表达状态。第66页,共129页,星期日,2025年,2月5日还有一种突变,使得阻遏蛋白结构变化,失去与诱导物乳糖的结合位点,结果使操纵子处于“不可诱导状态”。第67页,共129页,星期日,2025年,2月5日受一种调节蛋白控制的几个操纵子构成的调节系统叫做调节子。调节子(regulon)调节子是一种大范围内的基因表达控制调节手段。第68页,共129页,星期日,2025年,2月5日受到降解物阻遏调节的的酶类除了代谢乳糖的酶类外,还有分解半乳糖、阿拉伯糖、麦芽糖等的酶,这些操纵子都受到CRP的调节,属于一个“调节子”。这样保证在细胞遇到葡萄糖时,所有分解其他糖的酶都不表达,以免造成浪费。第69页,共129页,星期日,2025年,2月5日另外,细菌遇到危机情况下有许多基因表达,以便渡过危机时刻。这些基因属于SOS调节子,由基因LexA编码的阻遏蛋白控制。第70页,共129页,星期日,2025年,2月5日色氨酸操纵子(Trpoperon)组成和结构:全长约7kb调节基因trpR:与结构基因相距较远,编码阻遏蛋白操纵基因:位于结构基因的启动子内部,长21bp前导序列(leadersequence),162bp,位于结构基因启动子之后与结构基因之间,对结构基因的转录起调节作用。结构基因:5个,负责编码色氨酸合成途径中的3个酶。第71页,共129页,星期日,2025年,2月5日Trp操纵子结构基因的转录调控这里,操纵子结构基因的转录控制是由阻遏蛋白完成,但阻遏蛋白的活性是由色氨酸来激活的,我们把这里的色氨酸称为是一个“辅阻遏物(co-repressor)”当细菌内含有足够多的色氨酸后,2个分子的色氨酸与2分子的阻遏蛋白结合,激活阻遏蛋白,阻遏蛋白与操纵基因序列结合,阻止转录。当细胞内的色氨酸缺乏时,阻遏蛋白没有活性,结构基因开始转录,细菌开始合成色氨酸。第72页,共129页,星期日,2025年,2月5日似乎这个色氨酸操纵子的控制就是这么简单,但是其实不是。第73页,共129页,星期日,2025年,2月5日a当阻遏蛋白没有活性,结构基因开始转录时,大部分常常只能转录出大约140bp的mRNA就停止了后来的实验发现……b把位于操纵基因后面和结构基因前面的162bp序列中的130-162碱基删除后,trp操纵子的转录水平处于无阻遏的最高水平。这说明色氨酸操纵子的结构基因转录还受到其他因素的调控。第74页,共129页,星期日,2025年,2月5日Trp操纵子的衰减调控机制前导序列(leadersequence)分为4个部分(1-4):1为前导区,编码一个14肽,其中有2个连续的trp,前导序列中2和3互补,3和4互补,通过互补,可以形成类似终止序列的结构。第75页,共129页,星期日,2025年,2月5日典型的转录终止信号结构第76页,共129页,星期日,2025年,2月5日细胞内色氨酸含量高导致结构基因转录终止第77页,共129页,星期日,2025年,2月5日细胞内色氨酸含量低导致结构基因转录开始Animation*第78页,共129页,星期日,2025年,2月5日需要注意的几个问题1、前导肽的翻译只有调节后面基因转录的功能,翻译出来的肽没有其他生理功能!2、对结构基因转录的控制实际上是通过核糖体在mRNA上停留的位置来实现的。第79页,共129页,星期日,2025年,2月5日4、真核细胞中没有这种衰减调节
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