红花DGAT基因家族鉴定与功能研究.pdfVIP

摘要

摘要

CarthamustinctoriusL.

红花（）为菊科一年生草本植物，是兼具药用和油用价

值的重要经济作物。近年来红花成为人们研究的热点。在油料作物中，油脂主要

以三酰甘油（triacylgycerol，TAG）的形式贮存在种子中。二酰甘油酰基转移酶

DiacylgycerolAcylransferaseDGATTAG

（，）是合成中重要的限速酶，在油脂合

成中起重要作用。目前，红花DGAT基因家族及功能尚未报道。本研究通过生物

信息学方法对红花DGAT家族成员进行分析，筛选出与种子发育和油脂积累高度

相关的CtDGAT2-1基因，并对CtDGAT2-1基因进行功能研究，主要研究结果如下：

1.从红花全基因组数据库中共鉴定到12个DGAT基因。12个CtDGATs分布

在5条染色体上，呈不均等的分配。根据系统进化树分析将红花DGAT家族成员

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分为个亚组，相同的亚组基因结构和蛋白保守基序相似。顺式作用元件分析表

明，所有CtDGATs基因均有胁迫反应元件和光反应元件。

2.对CtDGATs进行表达模式分析，结果表明CtDGAT2-1基因在种子发育过程

中特异性高水平表达，推测红花种子油脂积累过程中CtDGAT2-1发挥了关键作用，

并且大部分CtDGATs都能被逆境胁迫诱导表达。

3.对CtDGAT2-1基因克隆，结果表明CtDGAT2-1的开放阅读框（ORF）全长

1002bp，编码了333个氨基酸。对CtDGAT2-1基因的生物信息学分析表明，

CtDGAT2-1为疏水性蛋白，包含2个跨膜结构域。CtDGAT2-1蛋白质包含DGAT2

蛋白所特有的PLNO2783保守结构域。亚细胞定位发现CtDGAT2-1蛋白主要分布

在内质网上。

4.构建CtDGAT2-1过表达载体，利用叶盘侵染法对烟草进行遗传转化，通过

潮霉素筛选出8个抗性植株。8个抗性转基因烟草中2，5，7株系相对表达量较高。

对转CtDGAT2-1基因烟草种子油脂含量和脂肪酸组成分析表明，过表达的OE-2、

OE-5、OE-7烟草种子油脂含量均显著高于野生型WT烟草种子，且过表达株系在

野生型烟草种子五种主要脂肪酸中，亚油酸含量最高，远远超过其他脂肪酸，这

一现象说明CtDGAT2-1基因与红花油脂积累正相关，有利于亚油酸的合成。

关键词：红花；DGAT；CtDGAT2-1；功能研究；油脂合成

I

Abstract

Abstract

Safflower(CarthamustinctoriusL.)isanannualherbintheasteraceaefamily.Itis

animportantcashcropwithbothmedicinalandoilvalue.Inrecentyears,safflowerhas

becomearesearchhotspot.Inoilseedcrops,oilismainlystoredinseedsintheformof

triacylgycerol(TAG).DiacylgycerolAcylransferase(DGAT)isanimportant

rate-limitingenzymeinTAGsynthesisandplaysanimportantroleinlipidsynthesis.At

present,theDGATgenefamilyandfunctionofSafflowerhavenotbeenreported.Inthis

study,membersoftheDGATfamilyofSafflowerwereanalyzedbybioinformatics

methods,CtDGA