DNA的一级结构测定和化学合成课件.pptVIP

質粒可以作為載體將外源基因引入受體細胞。3.真核細胞染色體DNA線形DNA分子。人體細胞DNA全長約2m,一成人全部DNA長2×1014m,是地球周長的5×106倍。真核細胞DNA含有重複順序（高重複順序、中等重複順序）。人類染色體真核生物細胞器中的DNA葉綠體和線立體DNA是環形DNA。線立體DNA小於20,000bp，為線立體tRNA和rRNA及少量線立體蛋白編碼。三、染色體DNA的堿基順序特徵細菌單染色體幾乎單拷貝（copy）真核生物重複序列（repeatedsequence）高度重複序列（highlyrepeatedsequence）/衛星DNA（satelliteDNA）：＜10bp，可重複百萬次，10%中度重複序列（moderatelyrepeatedsequence）：150-300bp，重複千餘次，20%單一序列（uniquesequence）高度重複序列大多與著絲粒（centromere）和端粒（telomere）相關著絲粒——細胞分裂端粒——染色體穩定間隔順序外顯子(exon)、內含子(intron)

和剪接（splicing）

外顯子：編碼片段內含子：非編碼片段剪接：從初級轉錄物中，剪掉內含子，將相鄰的外顯子連接起來的過程。人血清白蛋白第十一節

DNA超螺旋和染色質結構拓撲學（topology）:拓撲學用於研究一種物體在不斷變形情況下的某些不變的性質。如：一個閉合環形DNA分子在不切斷DNA主鏈的情況下，不管這個DNA分子怎樣變形或彎曲，它的拓撲學性質是不變的。一、DNA的拓撲學(topology)結構噬菌體T2DNA長約50μmE-coliDNA長約1mm人生殖細胞DNA長約1m細胞內DNA以超螺旋形式存在超螺旋結構2.自動測序HooddevelopedaprototypeautomatedDNAsequencerin1985LeroyHood(1938---)earnedanM.D.FromJohnsHopkinsUniversityin1964andaPh.D.inbiochemistryfromtheCaliforniaInstituteofTechnologyin1968.Hewonthe2003Lemelson-MITPrizeforinventingfourinstruments:theDNAgenesequenceandsynthesizer,andtheproteinsynthesizerandsequencer2004螢光物質作為標記物CCGAATGCTGACGTA螢光物質標記雙去氧核苷酸theSangerInstituteTeam55:SequencingFacility3.堿基序列測定的新方法(Nextgenerationmethods)美國國家衛生研究院（NIH）設立“RevolutionaryGenomeSequencingTechnologies”基金，目標:2009年，測定一人全基因組序列只$10萬，2014年，費用將降為$1000。Waston2007年5月31日獲贈裝有他本人完整基因組圖譜數據的DVD光碟。（2個月，$200萬）Pyrosequencing(焦磷酸測序,Biotage)454Sequencing—abrandofsequencingby454LifeSciences,thatdramaticallyexpandspyrosequencingSequencingbyhybridizationNanoporesequencingPolonysequencing(聚合酶克隆)4.DNA序列測定技術的應用生物基因組測序:人類30億堿基對PCR產物分析限制性酶切位點分析蛋白質結構、功能預測二、DNA的化學合成（DNAchemicalsynthesis）亞磷酸三酯法（H.GobindKhorana),3’→5’→保護5’-OH→堿基氨基亞磷酸化合物活化3’-OH亞磷酸三酯中間物磷酸三酯第十節

基因和基因組一、基因與基因組的基本概念1．基因（gene）經典生物學:基因是決定或影響生物體某一性狀或某一表現型的染色體上的某一